一般描述
Sigma 的 DNA 连接试剂盒包含进行 DNA 连接反应所需的所有试剂。粘性末端连接比平末端连接更有效。加入 PEG 可促进这些反应。
应用
适用于：
- 将 DNA 片段连接到克隆载体中
- 诱变
- 基因分析与结构功能关系
组分
足以进行 150 次反应：
- 在 250 mM Tris-HCl（pH 7.8），100 mM MgCl2 和 10 mM 二硫苏糖醇中的 300uL 10X 连接缓冲液（D2176）
- 含有 3 x 100 单位 T4 DNA 连接酶（D2886），10 mM Tris-HCl，pH 7.5，50 mM KCl 和 1 mM 二硫苏糖醇的 50％ 甘油溶液
- 3 x 100 uL 10 mM ATP（A3702）
- 50μL 对照 pBR322 DNA，HAE III Digest（D9430）浓度为 0.5 ug/ul，溶于 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）和 1 mM EDTA 中
- 1.5 mL 24％（w/v）PEG 溶液，（P 2454）
- 1.5 mL 分子生物学级水（W4502）
原理
克隆过程中最重要的步骤之一是将线性 DNA 连接到克隆载体中。在缓冲液、ATP 和 DNA 连接酶的存在下，通过将 DNA 片段与适当线性化的克隆载体孵育可进行 DNA 连接。插入物与载体的相对比例、DNA 末端的质量和类型、连接温度和 DNA 浓度等多种参数会影响连接。
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产品编号
说明
价格
警示用语：
Warning
危险声明
危险分类
Eye Irrit. 2
储存分类代码
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 3
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
法规信息
常规特殊物品
Sambrook, J., et al
Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2, 1-1 (1989)
Lei Wei et al.
Nature microbiology, 5(5), 715-726 (2020-03-11)
Chronic hepatitis B virus (HBV) infections result in 887,000 deaths annually. The central challenge in curing HBV is eradication of the stable covalently closed circular DNA (cccDNA) form of the viral genome, which is formed by the repair of lesion-bearing
Ausubel, F. M.
Current Protocols in Molecular Biology, 1, 3-3 (1994)
Quanxin Long et al.
PLoS pathogens, 13(12), e1006784-e1006784 (2017-12-30)
Hepadnavirus covalently closed circular (ccc) DNA is the bona fide viral transcription template, which plays a pivotal role in viral infection and persistence. Upon infection, the non-replicative cccDNA is converted from the incoming and de novo synthesized viral genomic relaxed
Bradley J Eckelmann et al.
NAR cancer, 2(3), zcaa013-zcaa013 (2020-08-11)
Homologous recombination/end joining (HR/HEJ)-deficient cancers with BRCA mutations utilize alternative DNA double-strand break repair pathways, particularly alternative non-homologous end joining or microhomology-mediated end joining (alt-EJ/MMEJ) during S and G2 cell cycle phases. Depletion of alt-EJ factors, including XRCC1, PARP1 and
实验方案
Cloning process, joining linear DNA into a vector, is crucial for biotechnological experiments, enabling DNA fragment recombinant technology.
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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