一般描述
快速DNA连接试剂盒包含连接必需的所有试剂。不需要其他试剂或添加剂。该试剂盒能够在+15到+25℃条件下，快速链接DNA平末端或粘性末端。按照反应体系中DNA浓度，连接产物可能是环状（如果DNA浓度较低）或多联体（如果DNA浓度高）。连接的DNA适合直接用于转化实验
注意：连接后再使用高纯度®PCR产物纯化试剂盒，可以进行电穿孔实验。
注意：连接后再使用高纯度®PCR产物纯化试剂盒，可以进行电穿孔实验。
特异性
平末端或粘性末端DNA(≤200 ng)。
热失活：65℃，10分钟（T4连接酶）
如果连接反应混合物要用非转化实验的其他实验，要使T4连接酶失活。
注意：转化实验前将连接反应混合物热失活会引起转化克隆数大量下降(>因素20)。
星活性： 必须避免星活性。当进行双酶切时容易出现星活性。查询Roche现实性内切酶公告（或Roche应用科学目录），选择特定酶组合最合适的缓冲液。可能的话，双酶切使用缓冲液H。
热失活：65℃，10分钟（T4连接酶）
如果连接反应混合物要用非转化实验的其他实验，要使T4连接酶失活。
注意：转化实验前将连接反应混合物热失活会引起转化克隆数大量下降(>因素20)。
星活性： 必须避免星活性。当进行双酶切时容易出现星活性。查询Roche现实性内切酶公告（或Roche应用科学目录），选择特定酶组合最合适的缓冲液。可能的话，双酶切使用缓冲液H。
应用
快速DNA连接试剂盒共价连接粘性末端或平末端DNA片段，从而：
- 克隆进质粒或噬菌体载体。
- 在质粒或其他DNAs上加接头。
- 重新环化线性DNA。
特点和优势
- 快速：连接只需要5分钟。
- 方便：+15℃到+25℃就可以进行连接
- 操作简单：试剂盒包含了所有缓冲液和酶。
- 用途广泛：试剂盒可用于所有一般的连接反应。
- 可靠：过程简单，试剂即用型，保证了精确性和可重复性。
包装
1个试剂盒包含3种组分。
制备说明
孵育时间：5分钟
DNA连接摩尔比例：标准连接反应中，载体DNA和插入DNA摩尔比例一般为1:3。然而，只要适合，你也可以使用其他比例。比如：
如果两条DNA长度差异大，可以尝试1:1或1:2比例
如果两条DNA是平末端，尝试1:5比例
DNA连接摩尔比例：标准连接反应中，载体DNA和插入DNA摩尔比例一般为1:3。然而，只要适合，你也可以使用其他比例。比如：
如果两条DNA长度差异大，可以尝试1:1或1:2比例
如果两条DNA是平末端，尝试1:5比例
其他说明
新快速DNADephos & 连接试剂盒包含了所有快速DNA连接试剂盒试剂，外加我们的新快速碱性磷酸酶。
法律信息
High Pure is a registered trademark of Roche
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- Dilution Buffer 5x concentrated
- T4 DNA Ligation Buffer 2x concentrated
- T4 DNA Ligase 5 U/μl
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
法规信息
常规特殊物品
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Monoclonal Antibodies against Plasmodium falciparum Circumsporozoite Protein
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实验方案
Rapid DNA Ligation Kit Protocol
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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