血管生成检测
微流控血管生成检测 内皮细胞粘附、侵袭和迁移检测 划伤愈合检测 内皮细胞表征 内皮细胞和培养基
血管生成是生成新的毛细血管的过程,是包括肿瘤生长和新陈代谢在内的许多正常(生殖和伤口愈合)和病理过程的基本组成部分。血管生长异常可能是许多致命和衰弱疾病的潜在原因,包括癌症、心血管疾病、中风、糖尿病和年龄相关的失明。
在肿瘤中,信号转导失调和缺氧条件导致持续的失控的血管生成,这是肿瘤生长和转移的必要组成部分。慢性炎症机制,如活性氧(ROS)的产生和促炎症细胞因子的分泌,都可以促进肿瘤进展期的血管生成。肿瘤中的血管生成信号转导与正常的血管生成类似,由可溶性生长因子、膜结合受体和细胞-细胞及细胞-基质相互作用介导。这种信号控制细胞迁移,这对血管生成至关重要。然而,肿瘤血管生成与正常血管形成之间存在许多差异。肿瘤内皮细胞比非肿瘤内皮细胞增殖快。肿瘤血管与正常血管在形态、渗漏增强和结构异常等方面存在差异。最后,肿瘤血管往往不能将氧气输送到所有肿瘤组织并清除肿瘤组织中的废物,导致肿瘤细胞经常坏死。
图 1.癌症血管生成。肿瘤可以刺激附近的正常细胞产生血管生成信号分子,从而形成新的血管。这些新的血管反过来为生长中的肿瘤提供氧气和营养,使癌细胞侵入附近的组织,在全身移动,并形成新的癌细胞群,称为转移瘤。
图 2.HUVEC血管生成检测。
于37 °C,在ECM基质中孵育6-10小时后,HUVEC细胞可形成丰富的管状血管网络,该产品提供于体外血管生成检测试剂盒(货号ECM625)。
图 3.随着异硫氰酸盐浓度的增加,如下图所示,HUVEC细胞的亮场和calcein-AM显微图中,血管的平均长度和分支点的平均数量均有所下降。
划伤愈合检测
划痕法是研究细胞迁移和血管生成的一种常用方法。简而言之,内皮细胞为汇合型生长,伤口是通过用移液器吸头、针或细胞刮板清除单层细胞的一个区域而产生的。细胞的填充首先通过迁移发生,尽管在清除区域的细胞最终也会增殖。但已经证明难以扩大这种技术的规模,因此难以对干预伤口修复的分子事件进行生化分析。Cell Comb™划痕测定满足了对能够以较高通量产生多个划痕伤口的简单工具的需求。
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图 4.划伤愈合检测
图 5.(A)人脐静脉内皮细胞的鹅卵石形态,HUVEC;(B) VEGFR2抗体免疫标记的HUVEC(绿色);(C) DiI-Ac-LDL染色的HUVEC(红色),内皮细胞特异性识别并内吞乙酰化的载脂蛋白;(D) HUVEC与人真皮成纤维细胞在VEGF存在下培养时形成囊状CD31/PECAM阳性(绿色)结构。
参考文献
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