细胞迁移与侵袭实验

图1。肿瘤转移是一个多步骤过程,涉及癌细胞的粘附、迁移以及向邻近组织和血管系统的侵袭。

图2。博伊登室(Boyden Chamber)检测方案。将细胞置于已接种在半透膜细胞培养插片上的细胞单层或细胞外基质(ECM)蛋白混合物中,并在膜下方添加趋化因子,使细胞通过该结构迁移。随后,可通过使用Calcein-AM或CyQUANT GR染料等DNA染料对细胞进行染色,从而对迁移的细胞进行定量。
细胞迁移与侵袭试剂盒
Millipore 的 QCM™ 细胞迁移与侵袭检测试剂盒提供了一种快速高效的系统,用于定量测定影响细胞迁移、粘附和侵袭的各种因素,包括药理学试剂的筛选,以及对负责细胞迁移的整合素、趋化因子或其他粘附受体的评估。十多年来,该试剂盒一直为研究人员提供一致的实验结果,并已被收录于 4000 多篇学术论文中。
细胞迁移检测:可便捷、灵敏地定量测定体外细胞向化学浓度梯度(趋化作用)或细胞外基质(ECM)蛋白梯度(触化作用)的迁移情况。
细胞侵袭检测:可便捷且灵敏地定量测定体外细胞穿过基底膜细胞外基质蛋白或内皮细胞等细胞层的侵袭能力。
如何为您的细胞选择合适的孔径:
- 3 μm 孔径适用于白细胞或淋巴细胞的迁移。
- 5 µm 孔径适用于部分成纤维细胞或癌细胞,如 NIH-3T3 和 MDA-MAB 231 细胞。也适用于单核细胞和巨噬细胞。
- 8 μm 孔径适用于大多数细胞类型。该孔径可支持大多数上皮细胞和成纤维细胞实现最佳迁移。注意:8 μm 孔径不适用于淋巴细胞迁移实验。
细胞迁移实验
微流控迁移装置
Millicell® µ-Migration 检测试剂盒克服了传统多孔板迁移实验的局限性。µ-Migration 载玻片的创新设计可形成稳定的扩散浓度梯度,该梯度始终呈线性,且可持续超过 48 小时。µ-Migration 载玻片采用光学性能媲美玻璃的塑料制成,专为视频显微镜实验而设计。 可在特定时间间隔内采集观察区域的图像,从而实现对细胞迁移的实时监测和定量测量。

图3。HT1080细胞的活细胞迁移。血清浓度(0%或10%)对HT1080细胞在胶原蛋白包被表面迁移倾向的影响。结果显示,大多数细胞朝向10% FCS梯度(黑色)方向进行定向迁移。
体外划痕实验
划痕实验是研究细胞迁移的一种常用方法⁴。然而,该技术的规模化应用一直面临挑战,这使得对介导伤口修复的分子事件进行生化分析变得困难。Cell Comb™ 划痕实验正是为满足这一需求而设计,它能够以高通量的方式生成多个划痕伤口。


图4。采用CellComb划痕实验,在NIH3T3细胞单层上以单向(左)或双向(右)模式制造划痕/创口。随着时间推移,迁移的细胞将填补划痕区域,并通过简单的细胞计数进行定量分析。此外,利用划痕迁移实验,还可以对迁移中的细胞进行活细胞成像。