简单易用的PCR添加剂
减少非特异性背景并提高PCR产量
ThermaStop™、ThermaGo™和ThermaStop™-RT试剂是可在不同温度下作用的简单易用型PCR添加剂(图1)。与热启动PCR不同,ThermaStop™和ThermaGo™添加剂可减少以DNA或RNA起始的扩增前、中、后的误差,从而提高PCR的特异性和灵敏度。这些PCR添加剂能使多重诊断反应变得更加准确并获得更多信息,并且还提高了所有下游应用的质量,其中包括下一代测序(NGS)、深度测序和Gibson组装。 ThermaStop™-RT添加剂也是一种双链核酸,但它在一步法RT-PCR和两步法RT-PCR中可作为逆转录酶的热启动剂。
图 1.不同温度下使用的PCR添加剂
* ThermaStop™-RT不宜与ThermaStop™或ThermaGo™添加剂一起使用
扩增期间在不同步骤和温度下存在错误引发的风险
防止误引发可改善PCR扩增结果。PCR反应的成功要诀在于特异性和效率。ThermaStop™试剂在扩增之前和之后起作用,而ThermaGo™试剂在PCR的变性、退火和延伸步骤中有效(图2)。
图 2.用于不同步骤的PCR添加剂可防止PCR过程中的错误引发
ThermaStop™ 添加剂是一种创新的热启动和冷终止试剂,可增强Taq DNA聚合酶特异性并提高PCR产物产量
ThermaStop™ PCR试剂是一种可逆添加剂,兼容所有Taq DNA聚合酶,包括热启动聚合酶。它能直接作用于聚合酶,以防止低于50°C时的非特异性酶活性。聚合酶活性在60℃时完全恢复,但随着反应冷却会再次被抑制。
- 让预混液能够长期存储
- 显著减少引物二聚体形成
- 促进PCR多重检测
- 提高反应灵敏度和特异性
- 冷却后去除不需要的产物
图 3.ThermaStop™ 添加剂可提高PCR反应的特异性和产量,从而实现更干净的扩增反应。
图 4.ThermaStop™ 添加剂可稳定预混液。
图 5.ThermaStop™ 添加剂可抑制PCR后的DNA聚合酶活性,从而起到冷终止的作用。
ThermaGo™ 添加剂在整个PCR反应过程中可增强Taq DNA聚合酶的特异性,并且可以与ThermaStop™添加剂协同作用增加Taq 酶的保真度
ThermaGo™ PCR试剂是一种双链化学修饰核酸,可抑制PCR退火和延伸步骤中的错误引发。它提高了实时和终点分析的可重复性。
- 减少标准和数字PCR中的信号分散
- 通过抑制非特异性产物的扩增,增加低拷贝数靶标的检测
- 改进终点基因分型
图 6.ThermaGo™添加剂能在扩增过程中起作用,减少信号分散并增加产物信号。线条代表来自Taqman探针的探针信号。
图 7.ThermaGo™添加剂在多重实验中通过防止扩增之前和期间的错误引发增强ThermaStop™添加剂的效果。
ThermaStop™-RT添加剂可改善RT-PCR的灵敏度、特异性和产物产量
ThermaStop™-RT可用于基因特异性引物引发的一步法或两步法逆转录PCR(RT-PCR)。
- 其能够在低温下与逆转录酶相互作用,减少会导致非特异性产物的错误引发
- 提高检测灵敏度和特定cDNA产量
- 提高高度多重RT-PCR检测的准确性
- 允许对极低水平的RNA进行准确的定量测定
图 8.ThermaStop™-RT添加剂在逆转录步骤具有活性,以防止错误引发。
图 9.ThermaStop™-RT添加剂可改善cDNA的实时检测。
ThermaStop™、ThermaGo™和ThermaStop™-RT添加剂是简单而通用的试剂,可添加至预混液中提高PCR扩增产物的产量和特异性。这些易于使用的试剂不需要进行优化便可用于不同的酶系统,您可以即刻开始提高您的PCR特异性和产量。
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