一般描述
辣根过氧化物酶是从辣根（Amoracia rusticana）中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量（约44 kDa）包括多肽链（33,890道尔顿）、氯化血红素加Ca2+ （约700道尔顿）和碳水化合物（约9,400道尔顿）。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。
应用
在评估前半抗原的皮肤致敏潜力时，使用了来自Sigma的酶。它也已用于显示过氧化物酶（PO）活性及其热稳定性与游离Ca2+离子的可用性相关。
辣根过氧化物酶（HRP）分离自辣根中（Amoracia rusticana）。 它可用于生物化学应用，如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子（例如蛋白质）的可检测性。 产品P6140已用于检测低密度脂蛋白（LDL）。
生化/生理作用
HRP易与过氧化氢（H2O2）结合，所得[HRP-H2O2]配合物可氧化各种氢供体。最佳pH为6.0-6.5，酶在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合，包括使用戊二醛、高碘酸盐氧化、二硫键以及氨基和巯基定向交联剂。它比酶标签，β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此，它是最理想的标签。而且，糖基化使其非特异性结合较低。它还用于测定溶液中的葡萄糖 和过氧化物 。已发现叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸、以及Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+、铅2+ 等离子可抑制其酶活性。
当与底物一起孵育时，辣根过氧化物酶可产生标记分子的有色荧光或发光衍生物，从而进行定量。 研究已显示辣根过氧化物酶可略微降低cydAB突变体中的抑制水平。
单位定义
一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。
外形
结晶混悬液溶于3.2 M (NH4)2SO4溶液，包含磷酸钾缓冲液中的，pH 6.0
制备说明
如果需要，可以用水稀释混悬液。
分析说明
RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275 。 它是血红素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。
初步研究表明存在两种碱性和无酸性同工酶
其他说明
有关过氧化物酶的更多信息，请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer。
底物
产品编号
说明
价格
抑制剂
产品编号
说明
价格
警示用语：
Danger
危险声明
预防措施声明
危险分类
Resp. Sens. 1
WGK
WGK 1
个人防护装备
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
法规信息
动植物源性产品
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N Santanam et al.
Journal of lipid research, 39(11), 2111-2118 (1998-11-04)
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Acta anatomica, 153(2), 135-144 (1995-01-01)
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商品
Discover our peroxidase from horseradish enzymes, products, substrates, and inhibitors for your ELISA, immunoassay, and protein application needs.
以硫酸铵悬浮液形式提供的酶的使用指南
Instructions for working with enzymes supplied as ammonium sulfate suspensions
实验方案
Reinheitszahl (RZ) is the ratio of absorbance due to hemin (A403, Soret region) to absorbance due to protein (A275).
To standardize a procedure for the assay of Peroxidase using 2,2'-Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) as a substrate.
This procedure is for the determination of Peroxidase enzymatic activity using Pyrogallol as the substrate.
该实验程序用于使用连苯三酚作为底物测定过氧化物酶的酶活性。
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