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一般描述
这种酶是一种糖蛋白,含约 12% 的碳水化合物(6% 己糖和 6% 其他中性糖)。每个碱性磷酸酶分子含有四个锌原子和四个二硫键。在镁存在的情况下,碱性磷酸酶活性达到最大。对磷酸对硝基苯基磷酸酯、磷酸苯酯、磷酸酚酞、α-甘油磷酸酯、β-甘油磷酸酯、2-磷酸甘油酯、磷酸丙糖酯、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖 1-磷酸、果糖 1-磷酸、果糖 6-磷酸、腺苷 5-磷酸腺苷 3-磷酸、磷酸烯醇丙酮酸和 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等磷酸单酯的水解进行催化。 砷酸盐、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐、磷酸二异丙酯、三苯基磷酸盐、氟磷酸二异丙酯和 L-苯丙氨酸是碱性磷酸酶的一些强抑制剂。
应用
Sigma 酶已用于测定磷脂酰肌醇-4-磷酸盐和磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸。它也被用于使用 氟磺酸™修饰电极的碱性磷酸酶检测。
推荐用于抗体和蛋白质缀合的高比活性等级。
碱性磷酸酶可用于酪蛋白和其他蛋白质的去磷酸化。碱性磷酸酶还可用于 DNA 或 RNA 的 5′-末端的去磷酸化,以防止自我连接。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后,DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记(通过 T4 多核苷酸激酶)。
碱性磷酸酶用于偶联抗体和其他蛋白,用于 ELISA、免疫印迹和组织化学检测。常规用于去磷酸化蛋白质,如酪蛋白和核酸。需要高灵敏度时可用于蛋白标记。也可用碱性磷酸酶对 5′-防止自身连接的 DNA 或 RNA 的末端。用碱性磷酸酶去磷酸化后,也可用放射性标记的磷酸盐(通过 T4 多核苷酸激酶)标记 DNA 或 RNA。产物 P5521 已用于研究 GTP 水解 。
生化/生理作用
来自牛肠粘膜的碱性磷酸酶在 pH 7.5-9.5 范围内最稳定。这种酶对醇、胺、焦磷酸和酚的磷酸酯有广泛的特异性,它需要锌、镁或钙的二价离子来具有活性。
该酶对醇类、胺类、焦磷酸盐以及酚类的磷酸酯具有广泛的特异性。常用于蛋白质和核酸的去磷酸化。
物理属性
牛肠碱性磷酸酶为二聚膜衍生糖蛋白。至少存在三种同工酶,每个单体通常拥有两个 N-连接多糖和一个或多个 O-连接多糖。2 该酶需要锌以及镁或钙二价离子才能显示活性。
牛肠道碱性磷酸酶是一种二聚化的膜衍生糖蛋白。其存在至少三种异构体,每个单体通常具有两个N-连接的和一个或多个O-连接的聚糖。
单位定义
在pH 9.8,37℃条件下,一个DEA单位可每分钟水解1 μmole的4-硝基苯基磷酸酯。(一个甘氨酸单位相当于~3个DEA单位)
外形
溶于 3.2 M 硫酸铵、1 mM MgCl 2 和 0.1 mM ZnCl 2 (pH 7.0)
制备说明
亲和纯化
本品由牛肠黏膜制备而成。应在 10 mM Tris-HCl (pH 8.0)、1-5 mM 氯化镁、0.1-0.2 mM 氯化锌和 50% 甘油中进行稀释,并在 2-8°C 下储存。
分析说明
包装规格取决于 DEA 单位
由缩二脲测定的蛋白质。
法律信息
Nafion is a trademark of The Chemours Company FC, LLC
底物
储存分类代码
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
个人防护装备
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
法规信息
动植物源性产品
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分析证书(COA)
Alkaline phosphatase (EC 3.1.3.1).
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 16, 331-341 (1993-01-01)
The Biochemical journal, 218(3), 785-793 (1984-03-15)
We have developed methods that yield estimates of the 32P content of each of the individual phosphate groups of phosphatidylinositol 4-phosphate and phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate, thus extending the information available from studies of the labelling of these lipids in intact cells
Determination of alkaline phosphatase using a Nafion?-modified electrode.
Journal of Electroanalytical Chemistry, 379(1), 281-291 (1994)
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 101(24), 8858-8863 (2004-06-05)
A remote labeling method has been developed to determine (18)O kinetic isotope effects (KIEs) in Ras-catalyzed GTP hydrolysis. Substrate mixtures consist of (13)C-depleted GTP and [(18)O,(13)C]GTP that contains (18)O at phosphoryl positions of mechanistic interest and (13)C at all carbon
The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society, 31(7), 911-919 (1983-07-01)
The immunohistological demonstration of H2 antigens in cryostat sections of a wide variety of mouse tissues is reported. The purpose in developing the method was to use H2 antigens as cellular markers in studies of mouse chimeras. Monoclonal anti-H2 antibodies
商品
以硫酸铵悬浮液形式提供的酶的使用指南
Instructions for working with enzymes supplied as ammonium sulfate suspensions
实验方案
Enzymatic Assay of Alkaline Phosphatase, Diethanolamine Assay (EC 3. 1. 3. 1)
碱性磷酸酶的酶法测定,二乙醇胺法(EC 3.1.3.1)
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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