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一般描述
Sigma shRNA 人类激酶混合慢病毒库
Sigma-Aldrich 在混合慢病毒筛选方面拥有长期的专业知识，涵盖整个基因组和定制库。由于激酶基因组的广泛需求，我们有幸提供一种经过优化的即用型shRNA激酶库成品，满足研究人员的需要。 这个混合库靶向人类激酶组（是一个通常与发育和疾病相关的大约 745 个基因的集合），每种独特的激酶基因平均有 12.6 个 shRNA 克隆。更重要的是，此 shRNA 池包含重要的富集、缺失和非靶标对照，使您的结果更真实可信，并降低了假阳性或假阴性的可能性。该慢病毒形式可实现转导细胞的稳定整合、筛选和富集，研究人员对成百上千个激酶基因进行功能性筛选所花费的时间和成本仅为筛选阵列克隆的一小部分。
如果您对小分子筛选或典型的发育信号通路感兴趣，Sigma的shRNA人类激酶慢病毒库将为您提供高通量解决方案，帮助您发现新型激酶靶点，特别是在必需基因和致死基因具有重要作用的情况下。
“CRISPRi 和 RNAi 所致基因沉默之间的差异，不仅不能说明任何一种方法存在技术缺陷，而是能引领生物新发现。CRISPRi 和 RNAi 作用机制的区别是： CRISPRi 靶向全部转录单元，包括选择性剪切异构体和嵌入式 ncRNA，而 RNAi 靶向成熟转录本，因此，相同的初级转录本经过 CRISPRi 和 RNAi 处理后，会得到不同加工产物。当用于靶向相同基因产物的试剂具有不同的 CRISPRi 和 RNAi 表型时，平行进行 CRISPRi 和 RNAi 筛选，可揭示新型转录本功能。”上述内容来自以下文献：Kampmann et. al. PNAS (2014) 112(26): June, 2015.
也请参考我们的人类激酶慢病毒 CRISPR 库，获取更多关于如何完善 RNAi 筛选的信息。
Sigma-Aldrich 在混合慢病毒筛选方面拥有长期的专业知识，涵盖整个基因组和定制库。由于激酶基因组的广泛需求，我们有幸提供一种经过优化的即用型shRNA激酶库成品，满足研究人员的需要。 这个混合库靶向人类激酶组（是一个通常与发育和疾病相关的大约 745 个基因的集合），每种独特的激酶基因平均有 12.6 个 shRNA 克隆。更重要的是，此 shRNA 池包含重要的富集、缺失和非靶标对照，使您的结果更真实可信，并降低了假阳性或假阴性的可能性。该慢病毒形式可实现转导细胞的稳定整合、筛选和富集，研究人员对成百上千个激酶基因进行功能性筛选所花费的时间和成本仅为筛选阵列克隆的一小部分。
如果您对小分子筛选或典型的发育信号通路感兴趣，Sigma的shRNA人类激酶慢病毒库将为您提供高通量解决方案，帮助您发现新型激酶靶点，特别是在必需基因和致死基因具有重要作用的情况下。
“CRISPRi 和 RNAi 所致基因沉默之间的差异，不仅不能说明任何一种方法存在技术缺陷，而是能引领生物新发现。CRISPRi 和 RNAi 作用机制的区别是： CRISPRi 靶向全部转录单元，包括选择性剪切异构体和嵌入式 ncRNA，而 RNAi 靶向成熟转录本，因此，相同的初级转录本经过 CRISPRi 和 RNAi 处理后，会得到不同加工产物。当用于靶向相同基因产物的试剂具有不同的 CRISPRi 和 RNAi 表型时，平行进行 CRISPRi 和 RNAi 筛选，可揭示新型转录本功能。”上述内容来自以下文献：Kampmann et. al. PNAS (2014) 112(26): June, 2015.
也请参考我们的人类激酶慢病毒 CRISPR 库，获取更多关于如何完善 RNAi 筛选的信息。
应用
功能基因组学/筛选/靶标验证
特点和优势
使用Sigma shRNA混合慢病毒敲低人类激酶
蛋白激酶是数量最多、研究最充分的基因家族之一。蛋白质磷酸化可介导发育、转录、免疫应答、代谢、凋亡和细胞分化过程中的信号转导，对真核生物的细胞间通讯具有重要作用。激酶的异常调控可引起多种疾病，对这类蛋白质及其功能的研究将有助于发现和开发新疗法。
Sigma shRNA人类激酶慢病毒混合文库含有：
蛋白激酶是数量最多、研究最充分的基因家族之一。蛋白质磷酸化可介导发育、转录、免疫应答、代谢、凋亡和细胞分化过程中的信号转导，对真核生物的细胞间通讯具有重要作用。激酶的异常调控可引起多种疾病，对这类蛋白质及其功能的研究将有助于发现和开发新疗法。
Sigma shRNA人类激酶慢病毒混合文库含有：
- 9,400多种慢病毒shRNA克隆，可敲低超过745个人类激酶基因
- 克隆覆盖率高（平均每个基因对应12.6个克隆），可提高命中率分析的统计强度
- 大量内在的富集和缺失克隆，使研究人员对实现混合筛选实验结果更自信（富集对照：PTEN和NF1；缺失对照：ANAPC2、ANAPC4和ESR1）。
- 该库含有50多个非靶标对照shRNA，作为标准化参照物（包括GFP、RFP、LacZ、荧光素酶和乱序对照）
组分
慢病毒人类shRNA激酶库共100 μl，分装为4管，25 μl每管，最低滴度为5x108病毒颗粒/ml。
原理
Sigma shRNA慢病毒
基于慢病毒的颗粒可将基因表达盒有效地转导和整合到分化和非分裂细胞（如神经元和树突状细胞）中。用互相兼容的包装质粒共转染包装细胞(HEK 293T)，可生产自灭活复制缺陷慢病毒颗粒。此外，慢病毒转导颗粒属于假型病毒，含有来自水疱性口炎病毒(VSV-G)的包膜糖蛋白G，可转导多种哺乳动物细胞。
基于慢病毒的颗粒可将基因表达盒有效地转导和整合到分化和非分裂细胞（如神经元和树突状细胞）中。用互相兼容的包装质粒共转染包装细胞(HEK 293T)，可生产自灭活复制缺陷慢病毒颗粒。此外，慢病毒转导颗粒属于假型病毒，含有来自水疱性口炎病毒(VSV-G)的包膜糖蛋白G，可转导多种哺乳动物细胞。
其他说明
本产品仅供研&发使用，不得用于药物、家庭或其他用途。有关危险和安全处理方法的信息，请参阅安全数据说明书。尽管产生的慢病毒转导颗粒不能复制，但建议在实验室操作中将其视为2级风险（RGL-2）物种。遵循所有已发布的RGL-2实验室处理和废物净化指南。
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 3
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
法规信息
新产品
Ana M Mendes-Pereira et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 109(8), 2730-2735 (2011-04-13)
Therapies that target estrogen signaling have made a very considerable contribution to reducing mortality from breast cancer. However, resistance to tamoxifen remains a major clinical problem. Here we have used a genome-wide functional profiling approach to identify multiple genes that
Ophir Shalem et al.
Science (New York, N.Y.), 343(6166), 84-87 (2013-12-18)
The simplicity of programming the CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats)-associated nuclease Cas9 to modify specific genomic loci suggests a new way to interrogate gene function on a genome-wide scale. We show that lentiviral delivery of a genome-scale CRISPR-Cas9
Profiling Essential Genes in Human Mammary Cells by Multiplex RNAi Screening
Silva, J. et al.
Science, 319, 617-620 (2008)
商品
When shRNA is delivered using lentiviral vectors, the sequence encoding the shRNA is integrated into the genome and the knockdown effect is passed on to daughter cells, continuing gene silencing.
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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