应用
推荐用于抗体和蛋白质缀合的高比活性等级。
碱性磷酸酶可用于酪蛋白和其他蛋白质的去磷酸化。碱性磷酸酶还可用于 DNA 或 RNA 的 5′-末端的去磷酸化，以防止自我连接。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记（通过 T4 多核苷酸激酶）。
碱性磷酸酶通常在酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫印迹和免疫组化等免疫学技术中与抗体和其他蛋白偶联。它通常用于蛋白质和核酸去磷酸化，也可用于高灵敏度的蛋白标记。碱性磷酸酶也可用于DNA 或 RNA 的5′-末端去磷酸化，以防止自身连接。用碱性磷酸酶去磷酸化后，也可用放射性标记的磷酸盐（通过 T4 多核苷酸激酶）标记 DNA 或 RNA。产物 P7923 已被用于一种新的产腈水解酶菌株筛选策略 。
该酶已被用于开发一种高灵敏度的免疫测定法，用于测定千分之一的碱性磷酸酶。它不仅被用于胰岛素原的免疫测定，也被用于预处理 ISG（未成熟分泌颗粒）膜，以研究其蛋白质组分的磷酸化。
生化/生理作用
来自牛肠粘膜的碱性磷酸酶在 pH 7.5-9.5 范围内最稳定。该酶对醇、胺、焦磷酸和酚的磷酸酯具有广泛的特异性。它在锌和镁或钙的二价离子存在下才具有活性 。
该酶对醇类、胺类、焦磷酸盐以及酚类的磷酸酯具有广泛的特异性。常用于蛋白质和核酸的去磷酸化。
这种酶是一种糖蛋白，含约 12% 的碳水化合物（6% 己糖和 6% 其他中性糖）。每个碱性磷酸酶分子含有四个锌原子和四个二硫键。在镁存在的情况下，碱性磷酸酶活性达到最大。它可催化磷酸单酯的水解，例如：对硝基苯基磷酸酯、磷酸苯基酯、磷酸酚酞、α-甘油磷酸盐，β-甘油磷酸、2-磷酸甘油酸、丙糖磷酸、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖 1-磷酸、果糖 1-磷酸、果糖 6-磷酸、腺苷 5-磷酸腺苷 3-磷酸、磷酸烯醇丙酮酸和 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。 砷酸盐、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐、磷酸二异丙酯、三苯基磷酸盐、氟磷酸二异丙酯和 L-苯丙氨酸是碱性磷酸酶的一些强抑制剂。
物理属性
牛肠碱性磷酸酶为二聚膜衍生糖蛋白。至少存在三种同工酶，每个单体通常拥有两个 N-连接多糖和一个或多个 O-连接多糖。2 该酶需要锌以及镁或钙二价离子才能显示活性。
牛肠道碱性磷酸酶是一种二聚化的膜衍生糖蛋白。其存在至少三种异构体，每个单体通常具有两个N-连接的和一个或多个O-连接的聚糖。
单位定义
在pH 9.8,37℃条件下，一个DEA单位可每分钟水解1 μmole的4-硝基苯基磷酸酯。（一个甘氨酸单位相当于~3个DEA单位）
外形
40%甘油溶液，含有6 mM Tris/HCl、6 mM MgCl2和0.12 mM ZnCl2，~pH 7.6
分析说明
包装规格取决于 DEA 单位
双缩脲法测定蛋白质。
底物
警示用语：
Danger
危险声明
预防措施声明
危险分类
Resp. Sens. 1
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
个人防护装备
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
法规信息
动植物源性产品
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实验方案
Enzymatic Assay of Alkaline Phosphatase, Diethanolamine Assay (EC 3. 1. 3. 1)
碱性磷酸酶的酶法测定，二乙醇胺法（EC 3.1.3.1)
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