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质量水平
描述
buffered aqueous solution
形式
lyophilized solid
技术
western blot: 1:2000-1:4000 using for detection of amino-terminal FLAG-BAP fusion protein in an E. coli crude cell lysate
运输
dry ice
储存温度
−20°C
一般描述
使用纯化的 FLAG 融合蛋白作为免疫原在兔中开发抗 FLAG 抗体。使用固定在琼脂糖上的蛋白 A 纯化完整的抗血清，以提供抗血清的 IgG 部分，并与辣根过氧化物酶结合。
抗-FLAG 识别位于 FLAG 融合蛋白上的 FLAG 表位。该抗体通过免疫印迹与 N-末端、N-末端-Met 和 C-末端 FLAG 融合蛋白反应。FLAG 肽（N-Asp-Tyr-Lys-Asp-AspAsp-Asp-Lys-C） 抑制特异性染色。偶联物的应用包括蛋白质印迹和 ELISA。
表位标签提供的方法可定位各种类型细胞中的基因产物、研究蛋白和蛋白复合物的拓扑结构、识别相关蛋白，并在没有蛋白特异性抗体时对新鉴定、丰度低或免疫原性低的蛋白进行表征。FLAG 肽序列标签可以在 N-端、前面有甲硫氨酸残基的 N-端、C-端或在靶蛋白的内部位置进行。FLAG也可以与其他标签一起使用。短FLAG标签或序列及其高亲水性倾向于降低干扰蛋白表达、蛋白水解成熟、抗原性和功能的可能性。N-端FLAG 肽序列含有独特的肠激酶切割位点，使其可以从纯化的融合蛋白中完全去除。已有报道，C-端FLAG 肽的Cu2+离子，可从融合蛋白催化切割。在大鼠和小鼠 Mg2+β 依赖性蛋白 b-磷酸酶以及人类细胞和牛细胞酶中发现了一种序列模体，其八个氨基酸残基中有五个与 FLAG 肽相同。
抗-FLAG 识别位于 FLAG 融合蛋白上的 FLAG 表位。该抗体通过免疫印迹与 N-末端、N-末端-Met 和 C-末端 FLAG 融合蛋白反应。FLAG 肽（N-Asp-Tyr-Lys-Asp-AspAsp-Asp-Lys-C） 抑制特异性染色。偶联物的应用包括蛋白质印迹和 ELISA。
表位标签提供的方法可定位各种类型细胞中的基因产物、研究蛋白和蛋白复合物的拓扑结构、识别相关蛋白，并在没有蛋白特异性抗体时对新鉴定、丰度低或免疫原性低的蛋白进行表征。FLAG 肽序列标签可以在 N-端、前面有甲硫氨酸残基的 N-端、C-端或在靶蛋白的内部位置进行。FLAG也可以与其他标签一起使用。短FLAG标签或序列及其高亲水性倾向于降低干扰蛋白表达、蛋白水解成熟、抗原性和功能的可能性。N-端FLAG 肽序列含有独特的肠激酶切割位点，使其可以从纯化的融合蛋白中完全去除。已有报道，C-端FLAG 肽的Cu2+离子，可从融合蛋白催化切割。在大鼠和小鼠 Mg2+β 依赖性蛋白 b-磷酸酶以及人类细胞和牛细胞酶中发现了一种序列模体，其八个氨基酸残基中有五个与 FLAG 肽相同。
免疫原
纯化的 FLAG 融合蛋白
应用
对于免疫印迹，建议使用 1:2000 – 1:4000 作为初始稀释度
浏览我们有关其他应用的参考文献，请访问 FLAG® 文献 FLAG® 文献页面。
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外形
冻干粉末
法律信息
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免责声明
仅供研究使用。不可用于药物、家庭或其他用途。有关危险和安全处理方法的信息，请参阅安全数据说明书。
警示用语：
Warning
危险声明
危险分类
Skin Sens. 1
WGK
WGK 2
法规信息
常规特殊物品
R G Chubet et al.
BioTechniques, 20(1), 136-141 (1996-01-01)
The FLAG peptide, AspTyrLysAspAspAspAspLys, has been used as an epitope tag in a variety of cell types. The modification of the cytomegalovirus (CMV) promoter containing vector, pCMV5, to create two transient expression vectors designed for secretion and intracellular expression of
A S Robeva et al.
Biochemical pharmacology, 51(4), 545-555 (1996-02-23)
An expression plasmid for mammalian cells (CLDN10B) has been modified to add nucleotides encoding hexahistidine and the FLAG peptide (H/F) to cDNAs. The new mammalian expression plasmid has been named pDoubleTrouble (pDT). The plasmid and a recombinant baculovirus were used
D P Humphreys et al.
Protein engineering, 12(2), 179-184 (1999-04-09)
The peptide sequence (N)DKTH(C) was investigated as a site for efficient, specific cleavage of a fusion protein by cupric ions using a humanised gamma1 Fab' as a model protein. The native upper hinge (N)DKTH(C) sequence was mutated to create a
K Schäfer et al.
Biochemical and biophysical research communications, 207(2), 708-714 (1995-02-15)
The FLAG peptide has been widely used as a multi-purpose tag for the identification and detection of recombinant FLAG fusion proteins. The practicability of this approach depends on specific detection of FLAG fusion proteins with no or very little cross-reactivity
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