推荐产品
重组
expressed in E. coli
质量水平
方案
≥90% (SDS-PAGE)
表单
lyophilized powder
包装
pkg of 1 kit (3 components)
运输
ambient
储存温度
−20°C
相关类别
一般描述
来自化脓性链球菌（Streptococcus pyogenes ）的重组dCas9-3X FLAG-生物素蛋白（~165KD）是用于基因组工程和基因组DNA检测、分离和成像实验的即用型试剂。当与靶点特异性向导RNA结合时，死亡的酿脓链球菌（Streptococcus pyogenes ）Cas9蛋白作为DNA靶标蛋白，适用于转染细胞培养物、显微注射、DNA下拉、染色质富集、微生物鉴定和原位DNA成像。在C末端，使用SV40大T抗原核定位信号（NLS）标记蛋白质以用于入核转运，使用3XFLAG表位和生物素标记蛋白质以用于基于FLAG抗体®或链霉抗生物素的实验。
应用
功能基因组学/靶标验证/基因组编辑/分子生物学/合成生物学/DNA检测/分离/DNA成像
特点和优势
- 高特异性
- 适用于基因组DNA检测/分离
- 可立即用于注射/转染
包装
- 50 μg包装（≥ 300 pmol）
- 250 μg包装（≥ 1500pmol）
组分
每个试剂盒包含：
- 一瓶dCas9重组蛋白
- 一瓶1×稀释缓冲液，1 mL
- 一瓶无核酸酶的水和甘油，1 mL
原理
CRISPR/Cas体系被细菌和古细菌用作抵抗入侵病毒和质粒的防御屏障。最近，来自化脓性链球菌（ Streptococcus pyogenes ）的II型CRISPR/Cas系统经过设计可用于真核系统，它采用两种分子组分：单个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA）。两个蛋白质结构域RuvC和HnH（分别为D10A和H840A）负责核酸酶活性，它们发生突变会导致Cas9内切核酸酶失活（dCas9）。随后，可以用gRNA对蛋白质进行编程，并指导其与所需的DNA序列结合。
重悬
dCas9蛋白冻干粉应使用提供的复原(Reconstitution)溶液重悬，获得所需浓度。轻轻敲打试管以完全溶解冻干的粉末，在冰上孵育10分钟，然后离心试管以使内容物离心至试管底部。
其他说明
法律信息
3xFLAG is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
储存分类代码
10 - Combustible liquids
法规信息
常规特殊物品
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分析证书(COA)
Lot/Batch Number
Matthew D Newton et al.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 2478, 349-378 (2022-09-06)
The discovery of CRISPR/Cas9 as an easily programmable endonuclease heralds a new era of genetic manipulation. With this comes the prospect of novel gene therapy approaches, and the potential to cure previously untreatable genetic diseases. However, reports of spurious off-target
实验方案
Guaranteed PURedit™ CRISPR synthetic gRNAs and Cas9 protein offer industry-leading on-site cutting and specificity
可靠的PURedit™ CRISPR合成gRNA和Cas9蛋白可提供行业领先的靶位点切割和特异性
Combine guaranteed sgRNAs with our comprehensive range of CRISPR products and tools, including Cas9 and delivery reagents, for efficient genome modification with higher specificity.
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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