重组
expressed in E. coli
质量水平
包装
vial of 50 μL
浓度
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
启动子
Promoter name: CMV
报告基因
RFP
运输
dry ice
储存温度
−20°C
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一般描述
Cas9表达质粒使用CMV启动子实现Cas9强瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。而且还可使用XbaI酶切将Cas9表达质粒线性化，以实现基于T7的mRNA表达。加入可与Cas9核酸酶共同表达的荧光团，可在转染成功后更易于观察。
应用
功能性基因组学/靶点验证
- 在多种细胞系中进行基因敲除
- 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
- 建立基因敲入细胞系，将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中
组分
1管包含1μg Cas9-2A-RFP 质粒
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。
原理
CRISPR/Cas 是细菌和古细菌的一种防御系统，可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA），该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9 核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂（DSB）。与锌指核酸酶（ZFN）诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合（NHEJ）或同源重组修复机制（HDR），对目标DSB进行修复。
外形
Sigma Cas9-2A-RFP 质粒的浓度为50ng/μl 的溶液20μl。
其他说明
为了介导DNA双链断裂，必须与U6-gRNA质粒一起使用。
文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）。
文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）。
法律信息
WGK
nwg
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
法规信息
常规特殊物品
实验方案
Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.
了解CRISPR Cas9、定义和工作原理。CRISPR是一种全新、实惠的基因组编辑工具，可让所有人掌握基因组编辑。
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默克Sigma-Aldrich® Advanced Genomics提供了一整套用于基因敲减和过表达实验的优化CRISPRi和CRISPRa文库目前可提供CRISPRi和SAM CRISPRa混合的慢病毒文库，也可根据您的特定需求提供定制产品。
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics is the leading provider of gene editing and silencing technologies including CRISPR, Cas9, synthetic guide RNA (sgRNA), and Zinc Finger Nuclease (ZFN).
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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