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Merck
CN

CAS9GFPP

CMV-CAS9-2A-GFP 质粒

别名:

Cas9 质粒

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关于此项目

NACRES:
NA.51
UNSPSC Code:
41106610
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recombinant

expressed in E. coli

packaging

vial of 50 μL

concentration

20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)

promoter

Promoter name: CMV

reporter gene

GFP

selection

kanamycin

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

Quality Level

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Other Notes

为了介导DNA双链断裂,必须与U6-gRNA质粒一起使用。

文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。(上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染)。
1管含1μg 的Cas9-2A-GFP质粒。

请注意,该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。

Application

CMV-CAS9-2A-GFP 质粒已被用于诱导人类U937白血病细胞中的额外性梳样1( sex combs-like1 )突变。它也已用于CRISPR/Cas9分析。
CMV-CAS9-2A-GFP质粒适用于以下功能基因组学/靶点验证:
  • 在多种细胞系中创建基因敲除
  • 完全敲除不适合RNAi的基因
  • 通过整合到内源基因中的启动子、融合标签或报告基因创造基因敲入细胞系

Biochem/physiol Actions

CRISPR/Cas被细菌和古细菌用作防御入侵病毒和质粒的防御系统。最近,来源于化脓性链球菌 的II型CRISPR/Cas系统已被设计为在真核系统中起作用,其使用两种分子组分:单一Cas9蛋白和非编码向导RNA(gRNA)。可以通过单个gRNA对Cas9内切核酸酶进行编程,从而将DNA双链断裂(DSB)导向所需的基因组位置。与由锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB类似,细胞随后激活内源DNA修复过程[非同源末端连接(NHEJ)或同源定向修复(HDR)],以愈合目标DSB。

General description

Cas9表达质粒使用CMV启动子,以实现Cas9的强瞬时表达。可以使用MluI和NheI替换CMV来进行启动子替换。此外,Cas9表达质粒可以使用XbaI进行线性化,从而用于基于T7的mRNA生成。添加与Cas9核酸酶平移共表达的荧光团可以容易地实现成功转染的可视化。

Legal Information

存储类别

10 - Combustible liquids

wgk

nwg

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

法规信息

常规特殊物品
此项目有

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Targeting synthetic lethality between the SRC kinase and the EPHB6 receptor may benefit cancer treatment.
Paul J M, et al.
Oncotarget, 7(31), 50027-50027 (2016)
CRISPR/Cas9-mediated ASXL1 mutations in U937 cells disrupt myeloid differentiation.
Wu Z J, et al.
International Journal of Oncology, 52(4), 1209-1223 (2018)

实验方案

Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.

了解CRISPR Cas9、定义和工作原理。CRISPR是一种全新、实惠的基因组编辑工具,可让所有人掌握基因组编辑。

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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