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重组
expressed in E. coli
质量水平
形式
liquid
包装
vial of 50 μL
浓度
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
启动子
Promoter name: CMV
报告基因
GFP
selection
kanamycin
运输
dry ice
储存温度
−20°C
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一般描述
共表达GFP的Cas9-D10A切口酶表粒使用CMV启动子，可获得较强的Cas9-D10A 瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。同时，使用XbaI酶切可使Cas9D10A表达质粒线性化，得到基于T7的mRNA产物。
应用
功能基因组
使用配对Cas9 切口酶+GFP 用于：
使用配对Cas9 切口酶+GFP 用于：
- 在多种细胞系中进行基因敲除
- 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
- 建立基因敲入细胞系，将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中
CMV-CAS9D10A-2A-GFP Plasmid has been used in CRISPR-Cas9 mutagenesis to truncate the forkhead box O3 (FOXO3) gene in the mammalian cell.
组分
每管包含1μg的 Cas9-D10A 切口酶-GFP质粒。
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。
外形
1μg Sigma Cas9-D10A 切口酶-GFP 质粒
其他说明
来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统经过包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA），该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂（DSB）。与锌指核酸酶（ZFN）诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合（NHEJ）或同源重组修复机制（HDR），对目标DSB进行修复。GFP通过2A肽段连接，与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达，实现了对转染效率的追踪，也能通过荧光激活细胞分选术（FACS）对基因组编辑活性进行富集。
法律信息
CRISPR专利正在申请中
WGK
nwg
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
法规信息
常规特殊物品
A protocol for custom CRISPR Cas9 donor vector construction to truncate genes in mammalian cells using pcDNA3 backbone
Vazquez N, et al.
BMC Molecular Biology, 19(1), 3-3 (2018)
实验方案
Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.
了解CRISPR Cas9、定义和工作原理。CRISPR是一种全新、实惠的基因组编辑工具，可让所有人掌握基因组编辑。
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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