一般描述
由链霉菌产生的胆固醇氧化酶分子量为62kDa。它的最适温度和pH分别为37 °C和7。胆固醇氧化酶包含FAD结合和类固醇结合结构域。
应用
来自链霉菌的胆固醇氧化酶已用于评估模拟胆汁的胶束结构与酯酶活性之间的关系。来自链霉菌的胆固醇氧化酶还被用于研究鞘磷脂降解对细胞胆固醇氧化性以及细胞表面与细胞内部之间稳态分布的影响。
胆固醇氧化酶可用于检测血清胆固醇。该酶还可用于对食品样品中的类固醇进行微量分析以及用于区分3-酮类固醇与3β-羟基类固醇。目前正在研究表达胆固醇氧化酶的转基因植物对棉铃象虫甲的抵抗性。CHOD也被作为分子探针，用于阐明细胞膜结构。
生化/生理作用
来自微生物的胆固醇氧化酶利用胆固醇获取碳和能量。它可用于涉及胆固醇的诊断测定，特别是脂质异常。胆固醇氧化酶具有杀虫性能，有助于防止棉铃象鼻虫幼虫的侵袭。链霉菌胆固醇氧化酶保存期长，并且具有良好的性能。
胆固醇氧化酶（CHOD）是一种含有FAD的单体黄素蛋白，它能催化胆固醇分解代谢过程中的第一步。在需要FAD的步骤中，这种双功能酶能够将胆固醇氧化成胆甾-5-烯-3-酮，然后随着H2O2的释放发生异构化，生成胆甾-4-烯-3-酮。
物理属性
等电点：5.1±0.1和5.4±0.1
米氏常数：4.3 x 10‾5M（胆固醇）
抑制剂：离子去污剂，Hg++，Ag+
最适pH值：6.5 − 7.0
最适温度：45–50°C
pH稳定性：pH 5.0–10.0 (25°C，20小时)
热稳定性：低于45°C（pH 7.0，15分钟）
米氏常数：4.3 x 10‾5M（胆固醇）
抑制剂：离子去污剂，Hg++，Ag+
最适pH值：6.5 − 7.0
最适温度：45–50°C
pH稳定性：pH 5.0–10.0 (25°C，20小时)
热稳定性：低于45°C（pH 7.0，15分钟）
单位定义
一个酶活性单位是指在pH 7.5、25℃下，每分钟将1.0 μM胆固醇转化为4-胆甾烯-3-酮所需的酶量。注意：4-胆甾烯-3-酮可能会发生异构化。
外形
冻干粉末，含有牛血清白蛋白和氨基酸作为稳定剂
制备说明
CHOD溶于冰冷的50 mM磷酸钾缓冲液，pH7.0。临用前配制。
警示用语：
Danger
危险声明
预防措施声明
危险分类
Resp. Sens. 1
WGK
WGK 3
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
个人防护装备
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
法规信息
含少量动物源组分生物产品
常规特殊物品
Extracellular cholesterol oxidase production by Streptomyces aegyptia, in vitro anticancer activities against rhabdomyosarcoma, breast cancer cell-lines and in vivo apoptosis
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Scientific reports, 8(1), 2706-2706 (2018)
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Yue QK, et al.
Biochemistry, 38(14), 4277-4286 (1999)
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Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany), 9(28), e2203597-e2203597 (2022-08-18)
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实验方案
Protocol for Assay Procedure for Cholesterol Oxidase
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本操作流程使用过氧化物酶和邻联二茴香胺在500nm处进行胆固醇氧化酶活性的测定。胆固醇氧化酶是一种以氧为受体而作用于供体的CH-OH基团的酶。
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