生物来源
bovine pancreas
质量水平
重组
expressed in Pichia pastoris
形式
lyophilized
比活
(>10,000 U/bottle according to Kunitz (+25°C; DNA as substrate).)
分子量
39 kDa
包装
pkg of 2 × 10,000 U
制造商/商品名称
Roche
浓度
≥70-90%
技术
protein extraction: suitable
颜色
white to light yellow
溶解性
water: soluble
适用性
suitable for molecular biology
NCBI登记号
UniProt登记号
应用
sample preparation
异质活性
Proteases, none detected
RNase, none detected
储存温度
2-8°C
基因信息
bovine ... DNASE1(282217)
一般描述
属性:它是一种双链特异性内切核酸酶,需要二价阳离子激发最大活性。
活性:根据Kunitz,每瓶含有10,000U(+ 25°C;DNA作为底物)。
单位定义:一个单位表示在测定条件下导致吸光度以0.001 /min的速率增加的酶活力。
活性:根据Kunitz,每瓶含有10,000U(+ 25°C;DNA作为底物)。
单位定义:一个单位表示在测定条件下导致吸光度以0.001 /min的速率增加的酶活力。
降解单链和双链 DNA;双链活性需要二价阳离子才能获得最大化。
应用
- DNase I(重组,I级)可用于:在蛋白质分离过程中消除DNA
- 染色质结构分析
- 在样品制备过程中消除DNA
特点和优势
内容物
冻干粉
冻干粉
单位定义
根据Kunitz,一个酶活力单位表示在测定条件下,在1ml中,导致260nm处的吸光度以0.001 /min的速率增加。体积活性是在0.1M乙酸钠,5mM MgSO4,pH 5.0条件下进行测定。
检测混合物:将小牛胸腺DNA(100 μg)与20至50U DNase I在+ 25°C下进行孵育。
对260nm处吸光度的增加进行测定。
信息说明:由于Kunitz检测具有高重复性和灵敏度,因此根据Kunitz检测,选择这些条件用于活性测定。当将该酶用于正常实验目的时,罗氏公司建议使用适合特定应用的孵育缓冲液,例如,在标准文献中所提到的缓冲液(Sambrook et al., Curr.Prot.Mol.Biol., etc.)。
检测混合物:将小牛胸腺DNA(100 μg)与20至50U DNase I在+ 25°C下进行孵育。
对260nm处吸光度的增加进行测定。
信息说明:由于Kunitz检测具有高重复性和灵敏度,因此根据Kunitz检测,选择这些条件用于活性测定。当将该酶用于正常实验目的时,罗氏公司建议使用适合特定应用的孵育缓冲液,例如,在标准文献中所提到的缓冲液(Sambrook et al., Curr.Prot.Mol.Biol., etc.)。
制备说明
激活剂:该酶需要二价阳离子激发最大活性。反应的特异性取决于所用阳离子的性质。在Mg2+存在的条件下,DNase I可在dsDNA上造成单链缺口,而在Mn2+存在的情况下,该酶可引起双链断裂。
储存条件(工作液):长期保存溶解酶
通常推荐溶解DNase I的溶剂是水。当DNase I在水中重构时,溶液可在2°C至8 °C 下保存2天,在-15°C至-20 °C 下保存1个月。为获得最佳效果,请制备适当的等分试样,避免反复冻融。然而,如需长期储存,则请将DNase I小心地溶解于下列缓冲液。在缓冲液1中,酶可稳定保存数周。如果溶解在缓冲液2、3或4中且在建议的温度下储存,则酶将稳定保存至少18个月。
信息说明:溶解时不要对酶进行涡旋混匀!
缓冲液1:20mM Tris-HCl、20mM MgCl2、5mM CaCl2、0.1mM二硫赤藓糖醇、0.1mM EDTA、50% (v/v)甘油,pH 8。此溶液储存在-15°C至-25°C条件下,不会冻结,且可稳定保存数周。
缓冲液2:20mM Tris-HCl、50mM NaCl、1mM二硫赤藓糖醇、100μg/mL BSA、50% 甘油(v / v),pH 7.6。此溶液可在-15°C至-25°C条件下最长储存18个月,且不会冻结。
缓冲液3:20mM Tris-HCl、1mM MgCl2、50% (w/v)甘油,pH 7.5。此溶液可在-15°C至-25°C条件下最长储存18个月,且不会冻结。
缓冲液4:20mM Tris-HCl、1mM MgCl2,pH 7.5。等量分装(例如,10 μ),在干冰上对等分试样进行快速冷冻,并在-60°C或更低温度下最长储存18个月。仅解冻每个实验所需用量。不可冷冻。弃去解冻后剩余的全部溶液。
储存条件(工作液):长期保存溶解酶
通常推荐溶解DNase I的溶剂是水。当DNase I在水中重构时,溶液可在2°C至8 °C 下保存2天,在-15°C至-20 °C 下保存1个月。为获得最佳效果,请制备适当的等分试样,避免反复冻融。然而,如需长期储存,则请将DNase I小心地溶解于下列缓冲液。在缓冲液1中,酶可稳定保存数周。如果溶解在缓冲液2、3或4中且在建议的温度下储存,则酶将稳定保存至少18个月。
信息说明:溶解时不要对酶进行涡旋混匀!
缓冲液1:20mM Tris-HCl、20mM MgCl2、5mM CaCl2、0.1mM二硫赤藓糖醇、0.1mM EDTA、50% (v/v)甘油,pH 8。此溶液储存在-15°C至-25°C条件下,不会冻结,且可稳定保存数周。
缓冲液2:20mM Tris-HCl、50mM NaCl、1mM二硫赤藓糖醇、100μg/mL BSA、50% 甘油(v / v),pH 7.6。此溶液可在-15°C至-25°C条件下最长储存18个月,且不会冻结。
缓冲液3:20mM Tris-HCl、1mM MgCl2、50% (w/v)甘油,pH 7.5。此溶液可在-15°C至-25°C条件下最长储存18个月,且不会冻结。
缓冲液4:20mM Tris-HCl、1mM MgCl2,pH 7.5。等量分装(例如,10 μ),在干冰上对等分试样进行快速冷冻,并在-60°C或更低温度下最长储存18个月。仅解冻每个实验所需用量。不可冷冻。弃去解冻后剩余的全部溶液。
储存及稳定性
密闭。干燥。
其他说明
仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。
警示用语:
Danger
危险声明
危险分类
Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
储存分类代码
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
法规信息
常规特殊物品
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