核酸酶(DNase和RNase)

核酸酶(DNase和RNase)的功能包括对DNA和RNA进行酶解,这对许多研究应用而言必不可少。例如,蛋白质和特定核酸的纯化通常需要对DNA、RNA或两者同时进行酶解。利用DNase通常可以缓解因高浓度DNA和酶法细胞裂解方法而导致的粘度问题。我们提供种类齐全的高纯度核酸酶产品,以满足大多数酶解需求。
Products
| DNA | DNA | 杂交 | ||||||
| 非特异性核酸酶 | 内切核酸酶 | 外切核酸酶 | 单链 单链 |
双链 | RNA | RNA | 产生3'-磷酸基 | 产生5'-磷酸基 |
| 涡轮核酸酶 | X | X | X | X | X | |||
| DNase I | X | X | X | X | ||||
| DNase II | X | X | X | X | ||||
| 微球菌核酸酶 | X | X | X | X | X | |||
| 核酸酶P1 | X | X | X | |||||
| 核酸酶 S1 | X | X | X | X | X | |||
| 磷酸二酯酶I | X | X | ||||||
| 磷酸二酯酶II | X | X | X | X | X | |||
| RNase A | X | X | X | |||||
| RNase H | X | X | X | |||||
| RNase T1 | X | X | X | |||||
| 优化核糖核酸酶混合物 | X | X | X | X |
限制性内切酶
用于DNA和RNA消化反应的核酸酶
我们的核酸酶在切割特异性以及最适pH值等特性方面各不相同,这使得研究人员能够选择最适合实验需求的消化酶。例如,源自哺乳动物的脱氧核糖核酸酶I可产生末端为5’ P1的产物,而源自柠檬青霉(Penicillium citrinum)的脱氧核糖核酸酶则可降解单链DNA和RNA,但不能降解双链DNA。 核糖核酸酶A可水解污染蛋白样本或质粒DNA制剂中的任何RNA。这些酶中的许多在分子生物学中还有其他用途。例如,DNase I会使DNA产生“缺口”,以便标记碱基的插入。RNase A是核糖核酸酶保护实验(RNase protection assay)中的工具,该实验用于测定特定mRNA的丰度。
脱氧核糖核酸酶 I 和脱氧核糖核酸酶 II(DNase)酶
脱氧核糖核酸酶 I 催化双链和单链 DNA 的内切酶水解,生成 5'-磷酸核苷酸和 5'-磷酸寡核苷酸终产物。水解产物是 5'-磷酸单核苷酸和寡核苷酸的复杂混合物。 在镁离子存在下,DNase I 会独立作用于 DNA 的每条链,且切割位点是随机的。在锰(II)离子存在下,DNase I 会在大致相同的位点切割 DNA 的两条链。大多数实验方案中,DNase I 与镁离子配合使用,但出于特定目的,也会使用锰离子。 此外,脱氧核糖核酸酶 II 可催化双链和单链 DNA 的内切酶水解,生成核苷酸 3'-磷酸盐和 3'-磷酸寡核苷酸终产物。其活性 pH 范围为 4.0 至 6.5,在 pH 6.5 时活性仅约 15%,最适 pH 值为 5.0。 该酶的最佳稳定性出现在pH 5–5.5之间,而在30 °C、pH 8.5时会迅速失活。我们提供种类丰富的DNase酶产品,以满足各类样本类型和应用需求。无论采用冻干还是液态形式,我们部分DNase产品均含有极低浓度的RNase或蛋白酶,以防止样本发生非预期降解。
核糖核酸酶 A、核糖核酸酶 H 和核糖核酸酶 T1
核糖核酸酶 A 催化 RNA 的内切裂解,生成以 Cp 或 Up 结尾的核苷 3'-磷酸盐和 3'-磷酸寡核苷酸。核糖核酸酶 A 的激活剂包括钾盐和钠盐。其活性最适温度为 60 °C,尽管该酶在 15-70 °C 范围内均表现出活性。 最适pH值为7.6,活性范围为6-10。该酶对单链RNA表现出最高的活性。RNase A是一种非常稳定的酶,可耐受高达100 °C的温度。 在100 °C下,RNase A在pH 2.0至4.5之间最为稳定。核糖核酸酶H特异性地水解RNA-DNA双链中RNA的磷酸二酯键,生成具有3'-羟基和5'-磷酸末端的产物。它仅降解DNA-RNA杂合体中的RNA成分(即与互补DNA链形成氢键的RNA)。
此外,核糖核酸酶T1催化RNA的两阶段内切酶水解,生成核苷酸3'-磷酸盐和主要以Gp为末端的3'-磷酸寡核苷酸。在该反应中,水解发生在鸟嘌呤核苷酸的3'-磷酸基团与相邻核苷酸的5'-羟基之间。 初始产物为 2':3' 环状磷酸核苷,该产物经水解后生成相应的 3'-核苷酸磷酸酯。在溶液中,该酶对热(pH 6 条件下 100 °C 处理 10 分钟)和酸具有耐受性,但在碱性溶液(pH > 9)中不稳定。 需要注意的是,该酶催化的反应无法通过将反应混合物加热至100 °C来终止。我们提供种类丰富的核糖核酸酶(RNase)产品系列,以满足各类样品和应用的需求。无论采用冻干还是液态形式,我们部分核糖核酸酶产品均含有极低浓度的蛋白酶,可有效防止样品发生非预期的蛋白质水解。