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Merck
CN

P8415

Sigma-Aldrich

过氧化物酶 来源于辣根

Type XII, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol)

别名:

供体:过氧化氢氧化还原酶, 辣根过氧化物酶

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About This Item

CAS号:
EC 号:
MDL编号:
UNSPSC代码:
12352204
NACRES:
NA.54

类型

Type XII

质量水平

形式

essentially salt-free, lyophilized powder

比活

≥250 units/mg solid (using pyrogallol)

分子量

~44 kDa

溶解性

0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0)
H2O: soluble

吸光度比值

RZ ≥3.0

储存温度

2-8°C

InChI

1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H

InChI key

JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N

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一般描述

HRP 是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有 18% 碳水化合物的糖蛋白。该碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成,具体取决于特定同工酶。其分子量(约 44kDa)包括多肽链(33,890 道尔顿)、氯化血红素(加 Ca2+)(约 700 道尔顿)和碳水化合物(约 9,400 道尔顿)。存在至少 7 种 HRP 同工酶。辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为 3.0-9.0。
辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的,属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成,具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca2+ (约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。

应用

来自辣根的过氧化物酶已被用于引发过氧化物酶偶联测定。它还被用于制备β-半乳糖苷酶(β-gal)储备溶液。
该酶长期用于通过使用荧光分光光度法测定烟草 BY-2 细胞中的 H2O2 产生。
辣根过氧化物酶(HRP)由辣根(Amoracia rusticana)中分离并属于过氧化物酶的铁卟啉基团,适合蛋白质印迹、ELISA 和免疫组化等生化应用。其作用是扩增弱信号并提高靶标分子(例如蛋白质)的可检测性。产品 P8415,XII型,是一种基本不含盐的冻干粉。也是产品 P8375 的进一步纯化的产物,常用于测定溶液中葡萄糖和过氧化物的量。长期用于烟曲霉快速敏感性分析

生化/生理作用

HRP 易与过氧化氢(H2O2)结合,生成的 [HRP-H2O2] 络合物可氧化各种氢供体。该酶的最佳 pH 值为 6.0-6.5,在5.0-9.0 的 pH 值范围内最为稳定。HRP 可以通过几种不同的方法与抗体结合,包括戊二醛、高碘酸盐氧化,通过二硫键,以及通过氨基和硫醇定向交联剂。它比酶标记物和 β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定,因此是最理想的标记物。此外,它的糖基化导致较低的非特异性结合。它还可用于测定溶液中的葡萄糖和过氧化物
当与底物一起孵育时,辣根过氧化物酶可产生标记分子的有色、荧光或发光衍生物,从而实现定量检测。研究表明,辣根过氧化物酶可以略微降低 cydAB 突变体中的抑制水平。已知的抑制剂有叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸,以及 Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+ 和 Pb2+ 离子。

其他说明

过氧化物酶 VI(P8375)的进一步纯化产物。
有关过氧化物酶的更多信息,请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer

单位定义

一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下,在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

制备说明

色谱纯化产品

分析说明

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275 。 它是血红素含量的量度,而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。
初步的等电聚焦数据表明这主要是同工酶 C

象形图

Health hazard

警示用语:

Danger

危险声明

预防措施声明

危险分类

Resp. Sens. 1

WGK

WGK 1

个人防护装备

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)

法规信息

动植物源性产品

分析证书(COA)

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实验方案

Reinheitszahl (RZ) is the ratio of absorbance due to hemin (A403, Soret region) to absorbance due to protein (A275).

To standardize a procedure for the assay of Peroxidase using 2,2'-Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) as a substrate.

This procedure is for the determination of Peroxidase enzymatic activity using Pyrogallol as the substrate.

该实验程序用于使用连苯三酚作为底物测定过氧化物酶的酶活性。

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