明胶是胶原蛋白的一种分子衍生物，通过对来自牛皮的胶原蛋白进行碱性消化而合成。明胶是一种水状胶体，富含甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸，具有结构稳定性。明胶可为细胞培养提供理想的细胞附着基质。最适浓度取决于细胞类型和研究对象。
明胶包被前重要注意事项
- 确保细胞健康且数量充裕。
- 明胶溶液需要在包被前在37°C下完全液化。
- 明胶溶液可4-8°C无限期保存；高温会导致水解和完整性损失。
- 常用表面覆盖浓度为100 – 200 µg/cm2。表面覆盖浓度可能因培养细胞而异。必须确定每种细胞系和应用的最佳附着条件。
- 包被之后切勿过度干燥，否则会破坏明胶结构并影响细胞附着。
用于细胞培养的明胶包被实验方案
- 将明胶溶解在组织培养级水中，制备2％（w / v）溶液。
- 在121°C、15 psi下高压灭菌30分钟。
- 5-10 µL明胶溶液/cm2（即100-200 µg/cm2）包被培养表面。
- 在加入细胞或培养基之前至少干燥2小时。
- 或者，也可使用明胶溶液（货号G1393）直接包被培养皿。
明胶包被培养皿常见问题
- 明胶产品的纯度是多少？
我们无法确定纤连蛋白溶液的纯度。我们所有的纤连蛋白粉末纯度均为70-90％。
- 稀释明胶粉的最佳溶剂是哪种？
表1中提供了适于稀释明胶的溶剂。
- 明胶可以储存多长时间？
明胶溶液可在2-8°C下无限期保存。如果将明胶包被板密封良好，可防止明胶污染和/或过度干燥，则最多可在2-8°C下保存4周。如果包被材料表面变色或出现裂纹，请勿使用产品。
- 明胶的 Bloom数有何意义？
Bloom数由 Oscar T. Bloom 提出，代表明胶膜强度。首先使用强度测定计通过受控过程测量明胶膜强度。数字越高，产品强度越大。 Bloom 数/ Bloom 强度有助于选择适合您应用的明胶产品。
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