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Merck
CN

SAB4200751

Sigma-Aldrich

抗-CRISPR/Cas9(C端)抗体,小鼠单克隆

clone 10C11-A12, purified from hybridoma cell culture

别名:

抗--Crispr, 抗-CRISPR相关蛋白9核酸酶, 抗-Crsipr RNA

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About This Item

UNSPSC代码:
12352203
NACRES:
NA.41

抗体形式

purified from hybridoma cell culture

质量水平

抗体产品类型

primary antibodies

克隆

10C11-A12, monoclonal

表单

buffered aqueous solution

浓度

~1.00 mg/mL

技术

immunoblotting: 1-2 μg/mL using whole extracts of human HEK-293T cells over-expressing CAS9 protein
immunofluorescence: 1.25-2.5 μg/mL using human HEK-293T cells over-expressing CAS9 protein
immunoprecipitation (IP): 5-10 μg/test using whole extract of human HEK-293T cells over-expressing CAS9 protein

UniProt登记号

运输

dry ice

储存温度

−20°C

靶向翻译后修饰

unmodified

一般描述

CAS9,也称为聚类规则间隔短回文重复序列(CRISPR)相关蛋白-9核酸酶,,是II型CRISPR -RuvC(RNase H样折叠)Cas系统的特征基因。CAS9含有1388个氨基酸。经预测,该蛋白质含有可参与CRISP RNA(crRNA)成熟的RuvC/核糖核酸酶(RNase)H结构域和可参与DNA降解步骤的McrA/HNH特征结构域。
CRISPR(聚类规则间隔短回文重复序列)属于II型CRISPR/CAS9系统。它是化脓链球菌SF370的适应性免疫系统的一部分,通过以序列依赖的方式切割外源DNA来免受病原体′靶基因的侵害。适配于在真核细胞中表达的II型CRISPR/Cas系统由四个基因组成,包括Cas9(CRISPR相关蛋白)核酸酶、两个非编码CRISPR RNA(crRNA或gRNA)、反式激活crRNA(tracrRNA)以及前体crRNA(pre-crRNA)阵列。pre-crRNA含有被相同直接重复序列(DR)间隔开的核酸酶向导序列(间隔子)。
可以通过单个gRNA对Cas9内切核酸酶进行改造,从而将DNA双链断裂(DSB)导向所需的基因组位置。与由锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB类似,细胞随后激活内源DNA修复过程[非同源末端连接(NHEJ)或同源定向修复(HDR)],以愈合目标DSB。
与设计者锌指(ZFs)、转录激活因子样效应物(TALE)和归巢核酸酶等其他基因组编辑技术相比,CRISPR/CAS9系统可扩展、可负担且易于改造。因此,抗-CRISPR/CAS9抗体可用于检测CRISPR/CAS9阳性转染的细胞、揭示基因组中的DSB位点和ChIP(染色质免疫沉淀)相关检测。

免疫原

化脓性链球菌Cas9 C末端区域的重组蛋白

应用

抗-CRISPR/CAS9(C末端)单克隆抗体可识别CAS9构建体过表达系统中的CAS9蛋白。该抗体可成功识别Cas9突变体,包括切口酶Cas9和失活Cas9(dCas9)。该抗体可用于各种免疫化学技术,包括免疫印迹、免疫荧光和免疫沉淀。抗-CRISPR/CAS9(C末端)单克隆抗体不与来自弗朗西丝菌的FnCas9以及来自酸性氨基球菌( BV3L6株)和毛螺旋菌ND2006的Cpf1蛋白存在交叉反应性。

生化/生理作用

CAS9在质粒DNA干扰中起着至关重要的作用。它是唯一对外源DNA具有抗性的Cas蛋白。CAS9可刺激RNA向导的基因组编辑和各种生物体中的基因调控,但它可以在任何给定细胞内一次仅促进一种活性。

外形

本品为溶液形式,溶于0.01M磷酸盐缓冲盐水,pH 7.4,含有15 mM叠氮化钠作为防腐剂。

储存及稳定性

若需连续使用,可在2-8°C下保存最长一个月。若需延长储存时间,可将溶液分装并冷冻。不建议反复冻融。如果长期储存时出现轻微浑浊,请在使用前通过离心澄清溶液。若工作稀释样品在12小时内未使用完,则应丢弃。

其他说明

本产品仅供研发使用,不得用于药物、家庭或其他用途。
为了在不同的技术和制备中获得最佳结果,我们建议通过效价测试确定最佳的工作浓度。

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储存分类代码

10 - Combustible liquids

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

法规信息

常规特殊物品

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