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用途
sufficient for 10 purifications
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一般描述
GenElute五分钟质粒小提试剂盒具有超简化的方案,可在约五分钟内产生高质量的质粒DNA。
用裂解试剂短暂处理(1-2分钟)重组 大肠杆菌 LB(Luria-Bertani)培养基过夜培养物以实现快速细胞裂解和RNA降解,并且无需事先除去培养基。然后将结合溶液与裂解物混合,并利用基于二氧化硅的结合柱对DNA进行捕获。通过洗涤溶液除去杂质,然后将结合的质粒DNA在Tris缓冲液或水中进行洗脱,产物可立即用于各种下游应用。从400 μL Lb培养基过夜培养物中一般可获得2-6 μg产率的高拷贝质粒。
GenElute五分钟质粒小提试剂盒采用新型裂解方法,无需从过夜培养物中沉淀细胞、去除生长培养基或清除中和的裂解液。将400 μl培养物加入到2mL收集管中,并将细胞裂解1−2分钟。然后加入结合溶液,使整个混合物通过结合柱。在洗涤柱以除去微量污染物后,将质粒DNA在10mM Tris HCl(pH8.5)中进行洗脱。分子生物学级水可以取代作为洗脱试剂。
用裂解试剂短暂处理(1-2分钟)重组 大肠杆菌 LB(Luria-Bertani)培养基过夜培养物以实现快速细胞裂解和RNA降解,并且无需事先除去培养基。然后将结合溶液与裂解物混合,并利用基于二氧化硅的结合柱对DNA进行捕获。通过洗涤溶液除去杂质,然后将结合的质粒DNA在Tris缓冲液或水中进行洗脱,产物可立即用于各种下游应用。从400 μL Lb培养基过夜培养物中一般可获得2-6 μg产率的高拷贝质粒。
GenElute五分钟质粒小提试剂盒采用新型裂解方法,无需从过夜培养物中沉淀细胞、去除生长培养基或清除中和的裂解液。将400 μl培养物加入到2mL收集管中,并将细胞裂解1−2分钟。然后加入结合溶液,使整个混合物通过结合柱。在洗涤柱以除去微量污染物后,将质粒DNA在10mM Tris HCl(pH8.5)中进行洗脱。分子生物学级水可以取代作为洗脱试剂。
在LB (Luria-Bertani)肉汤中过夜的重组大肠杆菌培养物采用裂解试剂快速处理(1-2分钟)以快速、有效地裂解细胞和降解RNA,无需事先去除培养基。随后将结合溶液与裂解液混合,DNA便结合到硅胶结合柱上。通过洗涤溶液去除杂质,然后在Tris缓冲液或水中洗脱结合所得的质粒DNA,以便直接供各类下游应用使用。采用400 mL过夜培养的LB肉汤时,高拷贝数质粒的通常得率为2-6 mg。
应用
GenElute五分钟质粒小量制备试剂盒可快速制备质粒DNA,产物可用于毛细管DNA测序、克隆测序、限制性酶切和PCR等应用。对于低拷贝数的质粒,该试剂盒可用于为限制性酶切和PCR等应用制备质粒DNA。
特点和优势
- 无需沉淀细胞或澄清裂解液
- 配套的结合柱适用于任何标准的实验室用真空歧管
- 至多可纯化出15 μg或足够进行15次测序反应的质粒DNA
- 产物DNA可直接用于毛细管DNA测序应用
其他说明
更多信息,请见www.sigma-aldrich.com/genelutehp。
法律信息
GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
警示用语:
Danger
危险分类
Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 2 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Corr. 1C - STOT SE 3
靶器官
Central nervous system
补充剂危害
储存分类代码
3 - Flammable liquids
闪点(°F)
69.8 °F
闪点(°C)
21 °C
法规信息
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