一般描述
磷酸化是将磷酸基团加到蛋白上,通过使蛋白激活或失活而改变蛋白功能,其中蛋白激酶起到重要作用。 酪氨酸残基磷酸化在细胞生长和分化中起重要作用。 磷酸酪氨酸单克隆抗体适用于免疫印迹法,用于鉴定人表皮样癌培养细胞系A-431和人血小板制剂中含磷酸酪氨酸的蛋白。本品可用于免疫荧光标记MDCK培养细胞粘着斑和细胞连接中的酪氨酸。本品还可用于研究信号转导和生长因子受体。本抗体可特异性结合含磷酸化酪氨酸残基的蛋白,酪氨酸残基为游离氨基酸形式或偶联KLH/BSA。它不会与非磷酸化酪氨酸或其他磷酸化蛋白和氨基酸反应, 它也不与ATP或AMP这类磷酸化分子反应。磷酸酪氨酸单克隆抗体的反应物种为小鼠和人。
磷酸酪氨酸单抗(小鼠IgG1同种型)来源于小鼠骨髓瘤细胞和脾细胞相互融合而产生的杂交瘤细胞。
经 ELISA 和竞争性 ELISA 确定,该抗体与磷酸化的酪氨酸特异性反应,该磷酸化的酪氨酸既可以是游离氨基酸形式,也可与 BSA 或 KLH 等载体结合的形式。与非磷酸化的酪氨酸、磷酸苏氨酸、磷酸丝氨酸、AMP 或 ATP 没有观察到交叉反应。
特异性
该抗体对磷酸化酪氨酸具有特异性,既可以作为游离氨基酸,也可以与载体(例如 BSA 或 KLH)偶联
免疫原
与 BSA 结合的磷酸酪氨酸
应用
小鼠抗磷酸酪氨酸单克隆抗体用于在免疫组化、流式细胞术、免疫沉淀、免疫印迹、ELISA和RIA中定位含磷酸化酪氨酸的蛋白质。它也可以用于免疫亲和分离。
小鼠磷酸酪氨酸单克隆抗体可用于
- 免疫细胞化学
- 免疫沉淀
- 蛋白印迹
- 多肽结合研究流式细胞术
- 酶联免疫吸附测定 (ELISA)
- 放射免疫分析 (RIA)
- 免疫亲和分离
生化/生理作用
细胞蛋白质中磷酸酪氨酸水平的增强导致由磷酸酪氨酸激酶介导的多种细胞过程的激活。磷酸酪氨酸残基通过与表皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)和胰岛素受体等受体相关的配体结合而发生自磷酸化,作为有丝分裂信号级联的主要组成部分。磷酸化酪氨酸介导 T 细胞的激活,这是由于 CD4 和 CD8 细胞质结构域中的酪氨酸激酶磷酸化酪氨酸残基,进而磷酸化 TCR-CD3 复合物。在许多其癌基因编码酪氨酸特异性蛋白激酶的逆转录病毒中也发现了磷酸酪氨酸活性。
酪氨酸残基磷酸化在细胞生长和分化中起重要作用。
外形
该产品以含有 15 mM 叠氮化钠的腹水液形式提供
储存及稳定性
需要连续使用时,可在 2-8°C 下储存一个月。对于更长期的储存,溶液可以冷冻成工作等分试样。不建议重复冷冻和解冻。不建议储存在“无霜”冰箱中。如果长期储存时出现轻微混浊,使用前通过离心澄清。
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