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OGS99

Sigma-Aldrich

PSF-CMV-INTRON1-INTRON表达质粒

plasmid vector for molecular cloning

别名:

snapfast 载体

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About This Item

UNSPSC代码:
12352200
NACRES:
NA.85

表单

buffered aqueous solution

分子量

size 4365 bp

菌种筛选

kanamycin

复制起点

pUC (500 copies)

肽切割

no cleavage

启动子

Promoter name: CMV
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian

报告基因

none

运输

ambient

储存温度

−20°C

一般描述

PSF-CMV-INTRON1 - INTRON EXPRESSION 质粒在启动子(CMV)与多个克隆位点之间包含一个嵌合内含子。其序列是人类 β 球蛋白基因的第一个内含子的嵌合体,由 R Reed 等人开发(《基因和发育》,1989年)。它可诱导真核细胞的有效剪接。我们发现,在体外使用强启动子时,内含子不会增加表达,但有报道称,内含子的存在可以增加较弱启动子的表达水平,还能增加体内表达时间。

启动子表达水平:PSF-CMV-INTRON1 - INTRON EXPRESSION 质粒包含一个哺乳动物 CMV 启动子,以驱动基因表达。我们已在一系列的细胞类型中测试了所有哺乳动物启动子,CMV 在我们研究过的细胞中始终是最强的。但也有很多关于 CMV 启动子在长期培养中通过甲基化沉默的报道。

应用

基因中的克隆:该质粒组合经过设计,可兼容各种克隆技术。多克隆位点包含一系列标准的常用限制性克隆位点。通过这些位点,可以使用DNA连接酶的标准克隆方法插入基因。也可以使用其他方法,如非连接酶依赖性克隆(LIC)Gibson Assembly InFusionHD或Seamless GeneArt,因为我们的所有质粒都基于相同的骨架,所以可以使用相同的方法克隆到我们所有的目录载体中。

多克隆位点说明:MCS中有一些重要位点,包括NcoI位点、XbaI位点以及BsgI和BseRI位点。NcoI位点含有起始密码子,其紧邻Kozak和Shine-Dalgarno核糖体结合位点的下游。当起始密码子位于该位置时,它们可帮助获得基因的最佳定位。如果不需要这样做,并且您希望使用下游位点进行基因克隆,则可以利用KpnI切割质粒来去除NcoI位点。

XbaI位点含有终止密码子。该终止密码子位于与紧邻下游的BsgI和BseRI位点相关的特定位置。当BseRI或BsgI切割质粒时,它们从XbaI位点的终止密码子处产生TA突出端,其与用相同位点切割的所有肽标签质粒相容。BseRI和BsgI位点是非回文结构的并且可切割远离其结合位点的限定数量的碱基。

每次将基因克隆到多克隆位点时,我们总是将起始和终止密码子定位在MCS中的相同位置。如果基因的起始和终止密码子与NcoI和XbaI不相容,则将序列延伸到最近的外部位点,但应保持起始和终止密码子的位置一致。

序列

欲查看本品的分析证书序列信息,请访问产品页面

分析说明

欲查看本品的分析证书,请访问 www.oxgene.com

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产品编号
说明
价格

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

法规信息

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