一般描述
通过离心分离法收集过夜的重组大肠杆菌培养液，然后通过改性SDS 碱裂解法进行处理。通过离心分离法收集细菌细胞，然后在含有RNase的重悬溶液中进行重悬。之后，裂解细胞并通过加入结合溶液使细胞变性。随后将制备的裂解液转移到在真空歧管中装配的Sigma HP滤板上进行过滤，然后收集到一个深孔板中。此真空歧管经过重新布置，过滤后的裂解液转移到Sigma HP结合反应板上。质粒DNA被捕获到硅胶膜上，杂质则通过连续的洗涤步骤去除掉。最后，对结合反应板进行干燥，并在洗脱溶液中洗脱质粒DNA。
GenElute HP 96孔质粒小量制备试剂盒为从重组大肠杆菌培养物中高通量纯化质粒DNA提供了一种简单、快速、低成本的解决方案。该试剂盒结合了硅胶结合技术和真空形式的便利性，可在50分钟内从1.3 mL的培养物中回收出至多10 μg高拷贝数质粒DNA。实际的得率和最佳的培养物体积取决于所用的质粒和培养基。
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应用
纯化所得的质粒DNA适于包括限制性酶切和测序在内的一系列分子生物学应用。
特点和优势
- 每孔至多可纯化出10 μg高拷贝数质粒DNA
- 可灵活选择手动或自动化形式
- 针对从MISSION shRNA质粒载体生产病毒滴度而优化
- 无需进行苯酚/氯仿萃取或乙醇沉淀步骤
法律信息
GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
警示用语：
Danger
危险分类
Acute Tox. 4 Oral - Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 3 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Corr. 1B - STOT SE 3
靶器官
Central nervous system
储存分类代码
3 - Flammable liquids
闪点(°F)
77.0 °F
闪点(°C)
25 °C
法规信息
动植物源性产品
危险化学品
Chunhua Wan et al.
Science advances, 7(21) (2021-06-18)
Aberrant activation of Wnt/β-catenin pathway is a key driver of colorectal cancer (CRC) growth and of great therapeutic importance. In this study, we performed comprehensive CRISPR screens to interrogate the regulatory network of Wnt/β-catenin signaling in CRC cells. We found
Eugenio Gallo
Molecular biotechnology, 62(2), 142-150 (2020-01-03)
Phage-display technology offers robust methods for isolating antibody (Ab) molecules with specificity for different target antigens. Recent advancements couple Ab selections with in silico strategies, such as predictive computational models or next-generation sequencing metadata analysis of Ab selections. These advancements
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