MISSION^® shRNA

我们全面的shRNA产品系列包括超过150,000个预克隆的shRNA构建体，靶向超过15,000个人类基因和15,000个小鼠基因。该文库可用于：基因家族集合：与特定功能类（如激酶和离子通道）相关的基因集合；基因靶标集合，针对靶标基因的shRNA克隆集合；以及单个shRNA克隆。我们的shRNA和慢病毒制造平台利用专门实验室，配备最先进的机器人技术、液体处理和实验室信息管理系统（LIMS），为您的RNAi研究需求提供卓越的质量和服务。

我们为学术研究、生物技术研究和药物研发提供创新解决方案。我们出色的系统、设备和人员可为您提供最优质的工具。

定制克隆：现在使用 TurboGFP^™
有时可能无法或不希望使用经典药物筛选出稳定或半稳定的细胞系。另外，对于多个 shRNA 的表达或与转基因表达伴随的 shRNA 的表达，可能需要从嘌呤霉素中选择正交方法。

我们现在提供含 tGFP 的载体解决这些问题。除了嘌呤霉素抗性基因被 TurboGFP 取代外，这一载体保留 pLKO.1 载体其他所有元素。我们的 MISSION 生物生产团队将使用 TRC shRNA 序列或您最喜欢的 shRNA 序列定制载体。当载体中含有 TurboGFP 时，FACS 和荧光显微镜技术可快速估算转导效率，并自动、快速选择稳定表达 shRNA 的细胞群。当细胞已经稳定表达嘌呤霉素抗性时，通过 GFP 进行的选择提供了一种正交方法。此外，我们还提供 pLKO.1-puro-CMV-tGFP。使用该载体，您可以选择使用 GFP 或嘌呤霉素筛选，都可通过该 shRNA 表达载体进行。

为了通过第二类抗生素进行选择，我们提供了含有新霉素抗性基因的载体。这两个载体是 pLKO.1-hPGK-Neo 和 pLKO.1-CMV-Neo。稳定的 shRNA 整合子可以通过使用 G418（产品编号 A1720）选择来获得。与嘌呤霉素一样，需要针对您的特定细胞系生成一个细胞毒性图谱。例如，请参见嘌呤霉素实验方案，但使用 G418 代替嘌呤霉素。作为起始点，1 mg/ml G418 用于选择 A549 细胞中的 shRNA 构建体。

该服务包括克隆、测序、DNA 制备（500 ng）和慢病毒制备（200 μl ，1 x 10⁶ TU/ml，通过 p24 测定的最小滴度）。DNA 和病毒制剂可在下订单后的 4-6 周内发货。如需订购，请访问定制 shRNA 订购页面或与销售人员联系。

大规模和高滴度慢病毒颗粒
我们具有通用制造平台，可用于大多数基于 HIV-1 慢病毒载体的高通量或大规模病毒生产。MISSION TRC shRNA 组合的标准形式是最小滴度为 200 μl 1 x 10⁶ TU/ml（通过 p24 测定）。任何克隆、靶标集或对照都可以以相同的最小滴度或更高的滴度大批量生产。我们最高的滴度选项是 10⁹ TU/ml。 我们还可以使用您发送给我们的克隆进行大规模和高滴度的病毒制备（必须与我们的系统兼容）。我们稳健且优化的流程将为您节省时间并减少转导实验中的可变性。要查看价格或提交特定项目的报价请求，请使用我们的“MISSION 定制请求提交表”。

想要查看实验方案和应用数据，请访问 sigma.com/shrna。

使用本产品需遵守一个或多个 许可协议。

MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

TurboGFP is a trademark of Evrogen Co.