一般描述
来自溶组织梭状芽胞杆菌的胶原酶由胶原酶 G 和 H 组成。胶原酶具有 N 端活化剂结构域和 C 端肽酶结构域。胶原结合域（CBD）和多囊肾疾病样（PKD 样）域位于肽酶域中。胶原酶模块在与钙结合时发生结构变化。
应用
来自溶组织梭状芽孢杆菌的胶原酶可用于从许多类型的动物组织中分离细胞。它可用于分解人肿瘤、小鼠肾脏、人成年/胎儿脑、肺和许多其他组织。它也可以用于肝脏和肾脏的灌注研究、胰腺的消化，非实质大鼠肝细胞的分离以及肝细胞的制备。
来自溶组织梭状芽孢杆菌的胶原酶可用于：
- 从胶原蛋白凝胶中回收中性粒细胞
- 将乳腺肿瘤活检组织分散成单细胞
- 从子宫内膜活检组织中分离人原代子宫内膜基质细胞（HESC）
生化/生理作用
粗胶原酶是溶组织梭状芽胞杆菌分泌的酶的混合物（主要是蛋白酶）。有效地从组织中释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩尔酶用 4 克原子钙 (Ca2+) 激活胶原酶。一般认为培养滤液至少含有 7 种不同的蛋白酶，分子量范围为 68-130 kDa。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
包装
按胶原消化单位（CDU）出售的产品。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。
制备说明
胶原酶可以溶解在 TESCA 缓冲液（50 mM TES，0.36 mM 氯化钙，pH 7.4，37°C）中，浓度为 0.05-0.1 mg/mL。
底物
警示用语：
Danger
危险分类
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
靶器官
Respiratory system
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
个人防护装备
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
法规信息
常规特殊物品
Structural stability enhancement of full-length clostridial collagenase by calcium ions
Ohbayashi N, et al.
Applied and Environmental Microbiology, AEM-00808 (2012)
V Pendaries et al.
Gene therapy, 17(7), 930-937 (2010-04-09)
Recessive dystrophic epidermolysis bullosa (RDEB) is a severe genodermatosis caused by loss-of-function mutations in COL7A1 encoding type VII collagen, the component of anchoring fibrils. As exogenous type VII collagen may elicit a deleterious immune response in RDEB patients during upcoming
Invasive trophoblast promote stromal fibroblast decidualization via Profilin 1 and ALOX5
Menkhorst EM, et al.
Scientific reports, 7(1), 8690-8690 (2017)
Electrophoretic cytopathology resolves ERBB2 forms with single-cell resolution
Kang CC, et al.
npj precision oncology, 2(1), 10-10 (2018)
Solution structure of clostridial collagenase H and its calcium-dependent global conformation change
Ohbayashi N, et al.
Biophysical Journal, 104(7), 1538-1545 (2013)
实验方案
在测定胶原酶活性时，使用N-（3-[2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。
To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.
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