应用
Fold ′n′ Glow Protein Solubility Assay kit可以让待测蛋白与荧光蛋白[例如，绿色荧光蛋白(GFP)，蓝绿色荧光蛋白(CFP)，黄色荧光蛋白(YFP) ]发生N端融合并进行表达。这使该产品可对给定样品中正确折叠的蛋白质进行检测，折叠后的报告子发出的信号与正确折叠蛋白量成正比。该试剂盒可用于对任意蛋白添加标签后进行检测和定量，可检测可溶蛋白及不溶蛋白。
特点和优势
荧光蛋白(GFP, CFP, 或YFP)融合及分离蛋白标记在蛋白分析中有着广泛的应用。这些大的标签可能影响蛋白的溶解性，使其发生异常折叠，并改变蛋白的生理进程。在“Fold ′n′ Glow”检测中所用的分离荧光蛋白技术克服了这些问题。这种蛋白标记通过基因进行编码，可利用分离荧光蛋白技术改造为小的可溶性自缔合片段。因此，这种简单的分离荧光蛋白系统不会改变融合蛋白的可溶性，也无需化学连接、融合互作伴体、共表达、共重折叠等。此外，虽然荧光双砷染料FlaSH或ReASH的底物同样可克服这些限制条件，但它们还需要一些分离荧光蛋白技术所不需要的条件。荧光蛋白系统是一种简单易用的标记及检测系统。这些试剂盒可用于定量标记蛋白的表达水平，测定蛋白溶解性，以及测定蛋白某个结构域的溶解性等。
适用性
该试剂盒含有足够用于一块96孔板的试剂（96次检测）
原理
该试剂盒提供了一种在荧光互补实验中使用分离荧光蛋白技术进行蛋白标记和检测的方法。需定量的蛋白会与一段荧光蛋白短片段（包含于S11质粒中）通过柔性连接子融合起来。由于它们是分别表达的，所以感兴趣的融合蛋白及荧光蛋白检测子（Universal Detection Reagent S1-10）均不发出荧光。当混合在一起时，正确折叠的融合蛋白和检测子会自发连接起来，共同构成荧光基团。而融合蛋白的异常折叠或聚积则会使荧光蛋白标签很难被接触到，防止互补的发生，从而阻碍荧光的产生。因此，异常折叠或聚积的蛋白不会被计算在感兴趣蛋白定量之内。
储存分类代码
10 - Combustible liquids
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
法规信息
新产品
Stéphanie Cabantous et al.
Nature biotechnology, 23(1), 102-107 (2004-12-08)
Existing protein tagging and detection methods are powerful but have drawbacks. Split protein tags can perturb protein solubility or may not work in living cells. Green fluorescent protein (GFP) fusions can misfold or exhibit altered processing. Fluorogenic biarsenical FLaSH or
G S Waldo et al.
Nature biotechnology, 17(7), 691-695 (1999-07-15)
Formation of the chromophore of green fluorescent protein (GFP) depends on the correct folding of the protein. We constructed a "folding reporter" vector, in which a test protein is expressed as an N-terminal fusion with GFP. Using a test panel
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