生物来源
bovine
质量水平
无菌性
irradiated
直径
21 mm , 5135-5EA
4 mm , 5135-25EA
厚度
1.5 mm , 5135-5EA
孔径
200 μm average pore size
一般描述
SpongeCol® 是一种具有相互渗透的圆柱状多孔结构的胶原蛋白海绵。SpongeCol® 包含独特的柱状多孔网络，该网络可使细胞和营养物质完全流过相互渗透的孔，并使得细胞附着、生长和迁移的表面积增加。它由高度纯化的 I 型胶原蛋白组成，可极好地支持细胞的附着、增殖和功能。胶原蛋白是轻度交联的，可提高短期和长期组织培养的机械强度和耐用性，但长期而言仍可生物降解。孔的直径为 100 至 400 微米，平均直径为约 200 微米。该产品经过最终灭菌，是即用型产品。
其他说明
5135-25EA 的直径为 4 mm，厚度为 1.5 mm，可以放入 96 孔培养板孔中。每个包装包含 25 个胶原海绵盘。
5135-5EA 的直径为 21 mm，厚度为 1.5 mm，可以放入 12 孔培养板或医用鲁尔接头（用于进行血流灌注）中。每个包装包含 5 个胶原海绵盘。
使用说明
制备和细胞接种
注意：细胞附着在海绵上通常是组织培养中最关键的步骤。温度、pH、气体交换和细胞浓度会影响附着的速率和效率。最佳接种率取决于培养的细胞类型。
1.在层流工作站中，从包装中无菌地取出海绵盘。
2.使用无菌仪器将海绵小心地放入 12 孔组织培养板的孔中。转移海绵时，请注意不要损坏海绵。建议使用未经处理的组织培养塑料器皿。
注意：组织包被的塑料器皿可能需要用琼脂糖包被，以防止细胞附着在塑料而不是海绵上。
3.以所需浓度（1x104 – 1x105 个细胞/mL）悬浮细胞，并分配足够量的细胞溶液于已置于孔中的海绵上。
注意：另一种方法是将细胞悬浮在中和的胶原蛋白溶液中（例如 PureCol™ I 型胶原蛋白，货号 #5006 或 PureCol™ EZ Gel，货号 ＃5074）。将胶原蛋白/细胞溶液分配到已置于孔中的海绵上。
4.转移到 37°C 的培养箱中约 1-2 小时，进行初始细胞附着。
注意：如果使用胶原蛋白悬浮法，胶原蛋白会在 37°C 聚合，并将您的细胞包裹在胶原蛋白基质和海绵中。
5. 1-2 小时后，从培养箱中取出培养皿并检查细胞附着情况。可能需要进行其他测试对细胞附着在海绵上所需的时间进行优化。检查细胞形态。细胞的黏附和扩散将决定附着的时间。
6.一旦细胞充分附着在海绵上，增加每个孔的最终体积以完全覆盖并为培养系统提供足够的培养基。
更换培养基
1.初始接种后 12-24 小时更换培养基。更换培养基的频率将取决于细胞类型、细胞附着效率、pH（保持在 7.0 到 7.4 的 pH 值），以及培养物对可用的营养成分的利用情况。与 2D 培养系统相比，可能需要更频繁的更换培养基。
细胞收获
注意：蛋白酶消化是从海绵中释放细胞的标准方法。细胞在胶原海绵上的附着强度因细胞系而异。酶的浓度和消化时间将根据酶的活性和细胞的融合而变化。胶原酶和/或胰蛋白酶可能是首选方法。
1.用 EDTA-PBS 洗涤海绵可以帮助蛋白酶消化。添加足够的体积覆盖海绵。
2.从孔中吸出 EDTA-PBS 溶液。
3.向孔中加入足够的消化液，完全覆盖海绵。
4.转移到 37°C 的培养箱中。定期检查细胞是否分离。
5.细胞完全分离后，取出细胞并分配到离心管中。
6.根据需要离心细胞。
5135-5EA 的直径为 21 mm，厚度为 1.5 mm，可以放入 12 孔培养板或医用鲁尔接头（用于进行血流灌注）中。每个包装包含 5 个胶原海绵盘。
使用说明
制备和细胞接种
注意：细胞附着在海绵上通常是组织培养中最关键的步骤。温度、pH、气体交换和细胞浓度会影响附着的速率和效率。最佳接种率取决于培养的细胞类型。
1.在层流工作站中，从包装中无菌地取出海绵盘。
2.使用无菌仪器将海绵小心地放入 12 孔组织培养板的孔中。转移海绵时，请注意不要损坏海绵。建议使用未经处理的组织培养塑料器皿。
注意：组织包被的塑料器皿可能需要用琼脂糖包被，以防止细胞附着在塑料而不是海绵上。
3.以所需浓度（1x104 – 1x105 个细胞/mL）悬浮细胞，并分配足够量的细胞溶液于已置于孔中的海绵上。
注意：另一种方法是将细胞悬浮在中和的胶原蛋白溶液中（例如 PureCol™ I 型胶原蛋白，货号 #5006 或 PureCol™ EZ Gel，货号 ＃5074）。将胶原蛋白/细胞溶液分配到已置于孔中的海绵上。
4.转移到 37°C 的培养箱中约 1-2 小时，进行初始细胞附着。
注意：如果使用胶原蛋白悬浮法，胶原蛋白会在 37°C 聚合，并将您的细胞包裹在胶原蛋白基质和海绵中。
5. 1-2 小时后，从培养箱中取出培养皿并检查细胞附着情况。可能需要进行其他测试对细胞附着在海绵上所需的时间进行优化。检查细胞形态。细胞的黏附和扩散将决定附着的时间。
6.一旦细胞充分附着在海绵上，增加每个孔的最终体积以完全覆盖并为培养系统提供足够的培养基。
更换培养基
1.初始接种后 12-24 小时更换培养基。更换培养基的频率将取决于细胞类型、细胞附着效率、pH（保持在 7.0 到 7.4 的 pH 值），以及培养物对可用的营养成分的利用情况。与 2D 培养系统相比，可能需要更频繁的更换培养基。
细胞收获
注意：蛋白酶消化是从海绵中释放细胞的标准方法。细胞在胶原海绵上的附着强度因细胞系而异。酶的浓度和消化时间将根据酶的活性和细胞的融合而变化。胶原酶和/或胰蛋白酶可能是首选方法。
1.用 EDTA-PBS 洗涤海绵可以帮助蛋白酶消化。添加足够的体积覆盖海绵。
2.从孔中吸出 EDTA-PBS 溶液。
3.向孔中加入足够的消化液，完全覆盖海绵。
4.转移到 37°C 的培养箱中。定期检查细胞是否分离。
5.细胞完全分离后，取出细胞并分配到离心管中。
6.根据需要离心细胞。
法律信息
PureCol is a trademark of Advanced BioMatrix, Inc.
SpongeCol is a registered trademark of Advanced BioMatrix, Inc.
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
Zhiyong Du et al.
Journal of cellular and molecular medicine, 25(2), 701-715 (2020-12-21)
Hepatic fibrosis (HF) is involved in aggravated wound-healing response as chronic liver injury. Extracellular vesicles (EVs) carrying microRNA (miR) have been reported as therapeutic targets for liver diseases. In this study, we set out to explore whether adipose-derived mesenchymal stem
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