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表单
solution
包装
pkg of 1,000 U (11040227001 [10 U/μl])
pkg of 200 U (11040219001 [10 U/μl])
制造商/商品名称
Roche
参数
37 °C optimum reaction temp.
运输
dry ice
储存温度
−20°C
特异性
识别位点：°CAT*ATG
°CAT*ATG
限制位点：°CA↓T*ATG
°CA↓T*ATG
热灭活：通过在 65℃ 温育 15 分钟可将 Nde 热灭活。
甲基化敏感性： Nde I 在识别序列上标明（*）的位置被内部 6-甲基腺嘌呤抑制。该酶不受 5-甲基胞嘧啶（°）的抑制。
°CAT*ATG
限制位点：°CA↓T*ATG
°CA↓T*ATG
热灭活：通过在 65℃ 温育 15 分钟可将 Nde 热灭活。
甲基化敏感性： Nde I 在识别序列上标明（*）的位置被内部 6-甲基腺嘌呤抑制。该酶不受 5-甲基胞嘧啶（°）的抑制。
质量
非特异性核酸内切酶活性缺失：1 μg λDNA 在含过量 Nde I 的 50 μl SuRE/Cut 缓冲液 H 中孵育 16 小时。在检验报告中说明不更改酶特异性模式的酶单位数。
核酸外切酶活性缺失：约 5 μg[3H] 标记的小牛胸腺 DNA 与 3 μl Nde I 在 +37℃ 下培养 4 小时，总容量为 100μl 50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM 二硫赤藓糖醇，pH 值约为 7.5。在这些条件下，如检验报告所述，未检出放射性释放。
核酸外切酶活性缺失：约 5 μg[3H] 标记的小牛胸腺 DNA 与 3 μl Nde I 在 +37℃ 下培养 4 小时，总容量为 100μl 50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM 二硫赤藓糖醇，pH 值约为 7.5。在这些条件下，如检验报告所述，未检出放射性释放。
相容性
相容的末端：Nde I 末端与 Asn I、Mae I 和 Tru9 I 生成的片段相容。
同工异构体：该酶没有已知的同工异构体。
同工异构体：该酶没有已知的同工异构体。
DNA图谱分析
不同DNA上的切割位点数
- λ: 7
- φX174: 0
- Ad2: 2
- M13mp7: 3
- pBR322: 1
- pBR328: 0
- pUC18: 1
- SV40: 2
单位定义
在总体积为 25 μl (1x)的（1x）SuRE/Cut 缓冲液 H 中，一个单位为在 +37 °C、1 小时内完全切割 μg λDNA 所需的酶活性。
制备说明
连接和重切割测定：
将通过完全消化 1 μg λDNA 获得的 Nde I 片段与 10 μl 的 1U T4 DNA 连接酶连接，连接方法是在 66 mM Tris-HCl 溶液（含 5 mM MgCl2、5 mM 二硫苏糖醇、1 mM ATP，在+20°C下pH 7.5）中在 + 4℃ 下孵育 16 小时，得到 1 μg λDNA 片段回收率 >95%。
随后用 Nde I 重新酶切，得到高于 95% 的典型 λDNA ×Nde I 片段。
孵育温度：+37°C
将通过完全消化 1 μg λDNA 获得的 Nde I 片段与 10 μl 的 1U T4 DNA 连接酶连接，连接方法是在 66 mM Tris-HCl 溶液（含 5 mM MgCl2、5 mM 二硫苏糖醇、1 mM ATP，在+20°C下pH 7.5）中在 + 4℃ 下孵育 16 小时，得到 1 μg λDNA 片段回收率 >95%。
随后用 Nde I 重新酶切，得到高于 95% 的典型 λDNA ×Nde I 片段。
孵育温度：+37°C
分析说明
SuRE/Cut缓冲系统
推荐使用粗体缓冲液以获得最佳活力
推荐使用粗体缓冲液以获得最佳活力
- A：25-50％
- B：75-100％
- H：100％
- L：10-25％
- M：50-75%
在 PCR 缓冲液中的活性：0%
在 PCR 混合液（Taq DNA 聚合酶缓冲液）中的相对活性为 0%。PCR 混合液含有靶 DNA、引物、10mM Tris-HCl（pH 8.3，20℃）、50mM KCl、1.5mM MgCl2、200 μM dNTP、2.5 U Taq DNA 聚合酶。该混合液可用于 25 个扩增循环。在 Pwo SuperYield DNA 聚合酶 PCR 混合液的反应缓冲液中的活性为 40%。当补充 GC-RICH 溶液时，活性增加至 100％。
在 PCR 混合液（Taq DNA 聚合酶缓冲液）中的相对活性为 0%。PCR 混合液含有靶 DNA、引物、10mM Tris-HCl（pH 8.3，20℃）、50mM KCl、1.5mM MgCl2、200 μM dNTP、2.5 U Taq DNA 聚合酶。该混合液可用于 25 个扩增循环。在 Pwo SuperYield DNA 聚合酶 PCR 混合液的反应缓冲液中的活性为 40%。当补充 GC-RICH 溶液时，活性增加至 100％。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- Enzyme Solution
- SuRE/Cut Buffer H 10x concentrated
法规信息
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