用途
sufficient for 500 reactions
25 μL sufficient for 500 reactions
质量水平
保质期
≤18 mo.
特点
dNTPs included
hotstart: no
制造商/商品名称
Roche
浓度
2 ×
技术
PCR: suitable
genotyping: suitable
输入
crude DNA
储存温度
−20°C
一般描述
KAPA2G 快速基因分型混合物（2X）是一种即用型主混合物，包括除引物和模板之外快速聚合酶链式反应所需的其他所有成分。ReadyMix™混合物还包含两种惰性染料，可以实现通过琼脂糖凝胶电泳分析PCR反应产物，而无需添加DNA上样溶液。KAPA Express Extract 系统包含一种设计用于快速样品降解的热稳定蛋白酶。KAPA Express Extract（一种新型热稳定蛋白酶和缓冲系统）能够在短短15分钟内从小鼠组织中提取出可立即用于PCR的DNA，带染料的 KAPA2G快速基因分型混合物含有的DNA聚合酶通过定向进化技术改造而具有高持续性和超高速。KAPA Express Extract和KAPA2G快速基因分型混合物的组合可在低至1小时内从小鼠组织中可靠地提取和扩增DNA片段，而传统方案则需要超过1天的时间。
应用
KAPA2G 快速基因分型混合物：
- 已被用于从小鼠尾巴、耳朵和脚趾组织中提取和扩增DNA
- 已被用于从其他动物组织和杂交瘤中提取和扩增DNA
- 适用于聚合酶链式反应（PCR）
生化/生理作用
以KAPA Express Extract提取的DNA使用KAPA2G 快速基因分型混合物和染料进行扩增。KAPA2G 快速基因分型混合物产生的DNA片段进行dA-tailed处理，并可克隆进TA克隆载体，或用于常规下游分析或应用，包括限制酶消化、克隆和测序。和野生型Taq一样，KAPA2G Fast 具有 5'→3'聚合酶和 5'→3'核酸外切酶活性，但是没有3'→5'核酸外切酶（校正）活性。KAPA2G Fast 具有类似于野生型 Taq的保真度；它的错误率为大约每结合1.7 x 105个核苷酸出现1次错误。裂解在热循环仪、加热器或水浴中进行，然后将样品离心，以回收含DNA的上清液。然后将上清液稀释10倍，再将其用作PCR模板。和依赖蛋白酶K消化的现有方案不同，采用KAPA Express Extract试剂盒可以在单个试管中方便地进行萃取，无需使用危险的化学物质或多个洗涤步骤。这一点显著降低了样本丢失或污染的风险。该过程可以产生充足的模板用于多种测定，并且易于放大，用于处理 96 孔板中的样品。每次萃取都能得到充足的模板，可用于至少100次基因分型PCR反应。萃取物（稀释的或未稀释的）在-15至-25°C下可稳定保存至少6个月。
特点和优势
提高生产能力、周转时间和可靠性：
优于粗提取方法和商业试剂盒：
快速注释：
- PCR-ready DNA 只需 15 分钟即可生成
- 最低限度的处理，从而降低样本丢失或污染的风险
- 有充足模板用于多种测定；易于缩放，以处理 96 孔格式的样本
- 快速可靠地扩增各种扩增子长度和 GC 含量各异的 DNA 片段
优于粗提取方法和商业试剂盒：
- 周转时间增加
- 特异性增加
- 成本降低
快速注释：
- 可以在短短 15 分钟内从小鼠尾巴、耳朵或脚趾组织中提取 PCR-ready DNA。PCR 前在 10 mM Tris-HCl (pH 8.0-8.5) 中稀释 DNA 提取物 10 倍，用 1 μL DNA/25 μL 反应。
- 提取液在 -20℃ 下可稳定储存 >6 个月。
- KAPA2G 快速(热启动) 基因分型混合物包含用于快速 PCR 的工程化 KAPA2G 快速 DNA 聚合酶，以及缓冲液、MgCl2 (1.5 mM，1X) 和 dNTP (每种 0.2 mM，1X)。
- KAPA2G 快速基因分型混合物中包含电泳上样染料，可将 PCR 产物直接上样到琼脂糖凝胶上进行分析。
- 对于 <1 kb 的扩增子，使用 15 s 退火时间，15 s 延伸时间，对于更长的扩增子，使用 15-30 s/kb 延伸时间。
质量
KAPA 小鼠基因分型试剂盒包含的所有组分都经过严格的质量控制测试，无污染的核酸外切酶和核酸内切酶活性，并且符合严格的 DNA 污染要求。
制备说明
在每次使用前，应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时，可将试剂保存 4°C 条件下（最长 1 个月）。长期储存时，应将试剂放回 -20°C 环境中。如果所有成分都经过小心处理且未被污染，试剂盒在室温下放置短时间（最长 3 天）预计不会受到损害。
其他说明
仅供研究使用。不可用于诊断过程。
法律信息
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- KAPA2G Fast DNA Polymerase
- KAPA2G Buffer A
- dNTPs 0.2 mM each at 1X
- MgCl2 1.5 mM at 1X
- stabilizers
- dye
警示用语：
Warning
危险声明
危险分类
STOT SE 2
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
法规信息
常规特殊物品
Veroniqa Lundbäck et al.
Physiological reports, 8(16), e14538-e14538 (2020-08-20)
In obesity, the expression level of thyroid stimulating hormone receptor in adipose tissue is reduced and the levels of thyroid stimulating hormone (TSH) are often elevated within the normal range. To investigate the role of TSHR in brown and white
Immunogenomic engineering of a plug-and-(dis) play hybridoma platform.
Pogson M, et al.
Nature Communications, 7, 12535-12535 (2016)
商品
An overview of directed evolution and the methods for generating proteins with optimized or entirely new functions.
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