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Merck
CN

APMB-RO

Roche

碱性磷酸酶

solution, from bovine (calf) intestine, 2 units/μg protein, optimum pH 7.5-9.5

别名:

ALP, CAP, CIAP, cip, 小牛肠磷酸酶, 正磷酸单酯磷酸水解酶

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About This Item

UNSPSC代码:
12352204

生物来源

bovine (calf) intestine

质量水平

形式

solution

比活

2 units/μg protein

包装

pkg of 1,000 U (10713023001 [1 U/μl])
pkg of 1,000 U (11097075001 [20 U/μl])

制造商/商品名称

Roche

参数

37 °C optimum reaction temp.

最佳pH

7.5-9.5

运输

wet ice

储存温度

2-8°C

一般描述

碱性磷酸酶(ALP)是一种普遍表达的糖蛋白。这种酶与细胞膜结合。ALP的激活需要必需的辅助因子,例如锌和镁。碱性磷酸酶可催化从磷酸化的各种化合物中除去磷酸基团。来自小牛肠的碱性磷酸酶可水解来自DNA和RNA的5′-单磷酸基团。它还可以水解RNA中的5′-二磷酸和5′-三磷酸基团。因此,肠道ALP是分子克隆常用的酶之一。

应用

可使用这种小牛肠碱性磷酸酶制剂从DNA或RNA和免疫沉淀的RNA样品中去除5′-末端磷酸盐。
注意:11097075001制剂含有高浓度的酶(20 U/μl),便于大规模实验。10713023001制剂的浓度较低(1 U/μl),便于小规模实验。

序列

AP是一种含锌酶,每分子含有4个锌原子(Efstradiatis,1977)。

单位定义

一个单位的碱性磷酸酶的酶活力单位表示,其在检测条件下,在+ 37℃,1分钟内可水解1 mol 4-硝基苯基磷酸酯。
注意:根据Moessner 等的研究。5单位碱性磷酸酶(+37℃;二乙醇胺缓冲液)对应于1单位碱性磷酸酶(+25℃;甘氨酸/NaOH缓冲液)。

单位换算:约3.6 U(MB级AP)
[+37℃,4-NPP作为底物,二乙醇胺作为缓冲剂,pH 9.8] = 1U [+25℃,4-NPP作为底物,甘氨酸作为缓冲剂,pH 10.5]。

体积活力:11097075001制剂为20 U /μl。 10713023001制剂为1 U /μl。

外形

10713023001:酶溶液(1 U/μl),溶于储存缓冲液中,pH 7.6 (20 °C)

11097075001:酶溶液(20 U/μl),溶于储存缓冲液中,pH 7.6 (20 °C)

制备说明

工作溶液:Storage buffer: 25mM Tris-HCl,1mM MgCl2,0.1mM ZnCl2,甘油50%(v/v),pH 7.6(4℃)。
储存条件(工作溶液):储存缓冲液中的MB级AP稀释液(1至5 U/μl)在2至8°C下可稳定保存17个月。
较高的稀释度(~0.01 U/μl)应每天新鲜配制,并保存在2至8°C。
在克隆过程中防止载体的自我连接
如果线性化载体缺乏5′磷酸,则不能与自身连接或形成含有多个载体拷贝的连环体。因此,连接反应的产物主要则为重组DNA(载体+DNA插入物),而不会是重新连接的质粒。
失活:向反应混合物中加入1/10体积的EGTA,并在+65℃下孵育10分钟。为确保酶完全失活,可通过苯酚/氯仿/异戊醇对混合物进行抽提以除去所有蛋白质。

其他说明

用于一般实验室用途。

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

法规信息

动植物源性产品

分析证书(COA)

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Xiangyu Chen et al.
PLoS biology, 13(12), e1002329-e1002329 (2015-12-20)
Interhomolog crossovers promote proper chromosome segregation during meiosis and are formed by the regulated repair of programmed double-strand breaks. This regulation requires components of the synaptonemal complex (SC), a proteinaceous structure formed between homologous chromosomes. In yeast, SC formation requires
Alkaline Phosphatase
Lowe D, et al
Journal of Separation Science (2023)
Qiang Zhao et al.
Physiologia plantarum, 174(4), e13731-e13731 (2022-06-20)
Saline-alkali (SA) stress induces excessive reactive oxygen species (ROS) accumulation in plant cells, resulting in oxidative damages of membranes, lipids, proteins, and nucleic acids. Melatonin has antioxidant protection effects in living organisms and thus has received a lot of attention.
Alkaline Phosphatase.
Green, Michael R and Sambrook, Joseph
Cold Spring Harbor Protocols, 100768-100768 (2020)
O Brenna et al.
The Biochemical journal, 151(2), 291-296 (1975-11-01)
A crude preparation of alkaline phosphatase (EC 3.1.3.1) from calf intestinal mucosa was purified by affinity chromatography on Sepharose-bound derivatives of arsanilic acid, which was found to be a competitive inhibitor of the enzyme. Three biospecific adsorbents were prepared for

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