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Merck
CN

2GRNTKB

Roche

KAPA2G Robust PCR 试剂盒

with dNTPs

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别名:
PCR
UNSPSC代码:
41106300
NACRES:
NA.55

质量水平

用途

sufficient for 200 reactions
sufficient for 500 reactions

保质期

≤12 mo.

特点

Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included
hotstart: no

包装

pkg of 100 U (KK5004)
pkg of 250 U (KK5005)

制造商/商品名称

Roche

技术

PCR: suitable

输入

crude DNA

储存温度

−20°C

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一般描述

经过改良的第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶可以解决广泛扩增子类型(富含 GC 和AT)的不一致扩增问题。该产品具有更高的持续合成能力和比活性,可转化为强大的 PCR 性能、高灵敏度和对常见抑制剂的耐受性。KAPA2G Robust DNA 聚合酶的高性能适合于挑战性 PCR 应用和困难样本扩增,显著降低使用多种酶和扩增方案的优化难度。

应用

KAPA2G Robust PCR 试剂盒适用于:
  • 扩增富含 GC 或 AT 的模板
  • 含有常见 PCR 抑制剂(例如,盐、尿素、SDS 或乙醇)的模板
  • 粗制样本 PCR,例如口腔拭子,培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
  • 菌落 PCR
  • 聚合酶链式反应聚合酶

生化/生理作用

KAPA2G Robust DNA 聚合酶具有 5′→3′ 聚合酶和 5′→3′ 核酸外切酶活性,但是没有3′→5′ 核酸外切酶(校正)活性。KAPA2G Robust具有类似于野生型 Taq的保真度;它的错误率为大约每结合1.7 x 105个核苷酸出现1次错误。KAPA2G Robust是一种高度持续性DNA聚合酶,能够以15秒/周期的延伸时间扩增高达1 kb的DNA片段。使用额外的延伸时间可能导致拖尾(smearing)和非特异性扩增。对于以基因组DNA为模板的1 kb<扩增子,每个周期15秒足以获得高产量的产物。对于较长的扩增子,时间可以增加到最大60秒/ kb,以15秒为增量。KAPA2G Robust生成的PCR产物是3′-dA尾的,可以克隆到TA克隆载体中。

特点和优势

有效扩增富含 GC 和 AT 的靶标
  • 强力扩增富含 GC 和 AT 的模板
  • 提高 PCR 成功率

改善对常见 PCR 抑制剂的耐受性
  • 从粗样本中有效扩增
  • 每单位酶的产率和灵敏度更高

在菌落 PCR 中具有无与伦比的性能
  • 大肠杆菌和酵母细胞直接 PCR 中具有更高的产量和更好的一致性

快速注释:
  • 带 dNTP 的 KAPA2G Robust PCR 试剂盒包含 KAPA2G Robust DNA 聚合酶,设计用于高处理能力和抑制剂耐受性。
  • 纯化的基因组 DNA 和粗制样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
  • 每 25 μL 反应使用 0.5 UKAPA2G 耐用 DNA 聚合酶。更具挑战性的 PCR(GCrich,粗品)可能需要更高的酶浓度。
  • 每个循环的延伸时间设置为 15 sec/kb,对于困难扩增子或模板,增加到 30-60 sec/kb。
  • 含有1.5mM MgCl2 的 KAPA2G 缓冲液(1X)。
  • 可以使用试剂盒中提供的 25mM MgCl2 溶液额外添加 MgCl2
  • KAPA2G 缓冲液 A 经过优化,具有高产量、特异性和灵敏度。
  • 对于抑制剂污染的模板样品,建议使用 KAPA2G 缓冲液 B。
  • KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR(>70% GC)。
  • KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用,特别适用于富含 GC 的 PCR 试验。
  • 反应产物是 3′-dA-尾,并且可以克隆到 TA 克隆载体中。

质量

每批 KAPA2G 耐用 DNA 聚合酶经确认含 < 2% 污染蛋白 (Agilent protein 230 Assay)。 KAPA2G 耐用 PCR 试剂盒经过严格的质量控制测试,没有污染外源和内切酶活性,符合 DNA 污染水平的严格要求。

制备说明

在每次使用前,应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时,可将试剂保存 4°C 条件下(最长 1 个月)。长期储存时,应将试剂放回 -20°C 环境中。如果所有组份在使用过程中非常仔细,没有受到污染,则试剂盒在短时间内(最多 3 天)被放置在室温下(无意中)预计不会失效。不建议在室温和 4°C 下长期储存。请注意,在 -20°C 以上的温度下储存的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此在超过 -20°C 的温度下储存的风险由用户自己承担。

其他说明

仅供研究使用。不可用于诊断过程。

仅试剂盒组分

产品编号
说明

  • KAPA2G Robust Standard or HotStart® DNA Polymerase 5 U/µL

  • 5X KAPA2G Buffer A with MgCl2

  • 5X KAPA2G Buffer B with MgCl2

  • 5X KAPA2G GC Buffer with MgCl2

  • 5X KAPA Enhancer 1

  • MgCl2 25 mM

  • dNTP Mix (optional) 10 mM each

象形图

Exclamation markHealth hazard

警示用语:

Warning

危险声明

危险分类

Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - STOT SE 2

WGK

WGK 1

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

法规信息

常规特殊物品

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