用途
sufficient for 100 reactions
sufficient for 500 reactions
质量水平
保质期
≤12 mo.
特点
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included
hotstart
包装
kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5701)
kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5702)
制造商/商品名称
Roche
浓度
2 × ( contains 2 mM MgCl2 at 1×)
技术
PCR: suitable
输入
crude DNA
储存温度
−20°C
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一般描述
第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶研发用于解决多种扩增子类型（富含GC和AT的扩增子）扩增不一致的问题。KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 具有更高的持续合成能力和特异活性，可实现稳健的PCR性能，灵敏度高，增强对常见抑制剂耐受性。KAPA2G Robust DNA 聚合酶的高性能非常适合具有挑战性的PCR应用和高难样品，无需使用多种酶和方案进行优化。
应用
KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 用于：
- 扩增富含 GC-或 AT-的模板
- 扩增含有常见聚合酶链反应（PCR）抑制剂的模板（抑制剂如盐、尿素、SDS或乙醇）
- 粗制样本 PCR（粗制样本如口腔拭子，培养的哺乳动物细胞、酵母细胞或细菌细胞）
- 菌落 PCR
- DNA 提取和扩增
- 突变筛查
- 甲基化特异性PCR（MSP）扩增
- 基因分型-PCR
- 基于PCR测序
生化/生理作用
用 KAPA2G Robust HotStart® DNA 聚合酶产生的DNA片段与用野生型Taq DNA 聚合酶产生的 DNA 片段具有相同特性，可用于限制性内切酶消化，克隆和测序等常规下游分析及应用。与野生型Taq一样，KAPA2G Robust HotStar 具有5'→3'聚合酶和5'→3'核酸外切酶活性，不具有3'→5'核酸外切酶（校对）活性。KAPA2G Robust HotStart 的保真度与野生型Taq相似。错误率约为每插入1.7 x 105个核苷酸产生1个错误。KAPA2G Robust HotStart产生的PCR产物带3'-dA尾，可以克隆到TA克隆载体。
特点和优势
高效扩增高GC和AT含量的靶标
提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
菌落 PCR 中无与伦比的性能
临时速记：
- 在广泛的高GC和AT含量模板中表现稳健
- 提高 PCR 成功率
提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
- 从粗制样品高效扩增
- 单位酶的产率和灵敏度更高
菌落 PCR 中无与伦比的性能
- 直接来自 大肠杆菌 和酵母细胞的 PCR产率更高，一致性更好
临时速记：
- KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix PCR 试剂盒包含 KAPA2G Robust DNA 聚合酶，专为高持续性和抑制剂耐受性而设计。
- 纯化的基因组 DNA 和粗制样品（例如菌落 PCR）均可用作模板。
- 每个循环使用 15 s/kb 的扩展时间，对于困难的扩增子或模板，增加到 30-60 s/kb。
- (1X) KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix 含有 2 mM MgCl 2 。
- 带染料KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix包括两种惰性追踪染料，可直接上样到琼脂糖凝胶上。
- KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix 是单方案 PCR 的理想选择，即使用单反应设置和循环方案扩增 25-65%GC ，至 1 kb 不等的片段。
- 反应产物为 3′-dA-尾，可克隆至 TA 克隆载体。
质量
每批KAPA2G耐用热启动DNA聚合酶均被证实含有< 2%的污染蛋白（安捷伦蛋白质230分析）。KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix PCR试剂盒经过严格的质量控制测试，不含污染性的外切和内切核酸酶活性，符合关于DNA污染水平的严格要求。
制备说明
使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下，以供短期使用（最长1个月）。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染，试剂盒在室温下放置短时间（最长3天）预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意，储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。
其他说明
仅供研究使用。不用于诊断操作。
法律信息
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- KAPA2G Robust HotStart® DNA Polymerase 1U per 25 µL reaction
- MgCl2 2mM at 1X
- dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X
警示用语：
Warning
危险声明
危险分类
Acute Tox. 4 Oral - STOT SE 2
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
法规信息
含少量动物源组分生物产品
常规特殊物品
Disseminated Human Subarachnoid Coenurosis
Labuschagne, et al.
Tropical medicine and infectious disease, 7 (2022)
TARGET-Seq: A Protocol for High-Sensitivity Single-Cell Mutational Analysis and Parallel RNA Sequencing
Meira AR, et al.
STAR protocols, 1 (2020)
Supplementation with N-3 long-chain polyunsaturated fatty acids or olive oil in men and women with renal disease induces differential changes in the DNA methylation of FADS2 and ELOVL5 in peripheral blood mononuclear cells.
Hoile S P, et al.
PLoS ONE, 9(10), e109896-e109896 (2014)
Massively parallel characterization of CYP2C9 variant enzyme activity and abundance
Amorosi, et al.
American Journal of Human Genetics, 108, 1735-1751 (2021)
ssAAVs containing cassettes encoding SaCas9 and guides targeting hepatitis B virus inactivate replication of the virus in cultured cells
Scott, et al.
Scientific Reports, 7 (2017)
商品
An overview of directed evolution and the methods for generating proteins with optimized or entirely new functions.
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