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Merck
CN

2GRHSKB

Roche

KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒

别名:

PCR试剂盒

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About This Item

UNSPSC代码:
41106300
NACRES:
NA.55

用途

sufficient for 1000 reactions
sufficient for 200 reactions
sufficient for 500 reactions
sufficient for 5000 reactions

质量水平

保质期

≤12 mo.

特点

Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included: no
hotstart

包装

pkg of 100 U (KK5522)
pkg of 250 U (KK5515)
pkg of 2500 U (KK5525)
pkg of 500 U (KK5517)

制造商/商品名称

Roche

技术

PCR: suitable

输入

crude DNA

储存温度

−20°C

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一般描述

第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶的进化解决了广泛扩增子类型(富含 GC 和 AT)的不一致扩增。KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒能够实现更高的过程性和比活性,这转化为稳健的 PCR 性能、高灵敏度和对常见抑制剂的耐受性改善。KAPA2G 稳健 DNA 聚合酶的高性能非常适合具有挑战性的 PCR 应用和困难的样本,无需使用多种酶和方案进行优化。

应用

KAPA2G Robust HotStart® PCR试剂盒已用于:
  • 唾液样本的PCR扩增
  • PCR扩增以便进行直接测序
  • 巢式PCR
  • 扩增富含 GC 或 AT 的模板
  • 含有常见 PCR 抑制剂(例如,盐、尿素、SDS 或乙醇)的模板
  • 粗制样本 PCR,例如口腔拭子,培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
  • 菌落 PCR
  • RT-PCR

生化/生理作用

KAPA2G Robust HotStart® DNA聚合酶产生的DNA片段与野生型Taq DNA聚合酶产生的DNA片段相似。KAPA2G Robust HotStart聚合酶的保真度近似于野生型Taq聚合酶;错配率为每1.7 x 105核苷酸约有1个错误。它可用于限制性内切酶消化、克隆和测序。同野生型Taq聚合酶一样,KAPA2G Robust HotStart聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性,但不具有3′→5′外切酶(校正)活性。

特点和优势

高效扩增富含 GC 和 AT 的靶标
  • 在各种 GC 和 AT 富集模板中表现稳健
  • 提高 PCR 成功率

提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
  • 从粗样品中高效扩增
  • 每单位酶的产量和灵敏度更高

菌落 PCR 中无与伦比的性能
  • 来自大肠杆菌和酵母细胞的 PCR direct 产量更高,一致性更好

快速注释:
  • KAPA2G Robust HotStart PCR Kit 包含 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶,设计用于高处理能力和抑制剂耐受性。
  • 纯化的基因组 DNA 和粗样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
  • 每 25μ 使用 0.5 UKAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶L 反应。更具挑战性的 PCR(GCrich,粗品)可能需要更高的酶浓度。
  • 每个循环使用 15 s/kb 的延伸时间,对于困难的扩增子或模板,增加到 30-60 s/kb。
  • KAPA2G 缓冲液含 1.5 mM MgCl2 (1X)。
  • 可使用试剂盒中提供的 25 mM MgCl2 溶液添加额外的 MgCl2
  • KAPA2G 缓冲液 A 针对高产量、高特异性和高灵敏度进行了优化。
  • 推荐将 KAPA2G 缓冲液 B 用于抑制剂污染的模板样品。
  • KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR ( 70%GC)。
  • KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用,尤其是用于富含 GC 的检测。
  • 反应产物具有 3′-dA 尾式,可克隆至 TA 克隆载体。

质量

每批 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶经确认含<2% 污染蛋白 (Agilent protein 230 Assay)。KAPA2G Robust HotStart PCR kits 经过严格的质量控制测试,没有污染的外切和内切核酸酶活性,满足 DNA 污染水平方面的严格要求。

制备说明

在每次使用前,应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时,可将试剂保存4°C条件下(最长1个月)。长期储存时,应将试剂放回-20°C环境中。如果所有组分均经过仔细处理且无污染,则在室温下(无意地)短时间(最多3天)放置,预计不会破坏试剂盒。不建议在室温和4°C下长期保存。请注意,储存在高于-20°C的温度下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此在此温度下储存的风险由用户自负。

其他说明

仅用于研究目的。不用于诊断程序。

法律信息

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

仅试剂盒组分

产品编号
说明

  • KAPA2G Robust Standard or HotStart® DNA Polymerase 5 U/μL

  • 5X KAPA2G Buffer A

  • 5X KAPA2G Buffer B

  • 5X KAPA2G GC Buffer with MgCl2

  • 5X KAPA Enhancer 1

  • MgCl2 25 mM

象形图

Exclamation markHealth hazard

警示用语:

Warning

危险声明

危险分类

Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - STOT SE 2

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

法规信息

常规特殊物品

分析证书(COA)

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