质量水平
用途
sufficient for 100 reactions
sufficient for 500 reactions
保质期
≤18 mo.
特点
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included
hotstart
包装
kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5620)
kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5621)
制造商/商品名称
Roche
技术
PCR: suitable
genotyping: suitable
输入
crude DNA
储存温度
−20°C
一般描述
KAPA2G Fast HotStart®小鼠基因分型试剂盒包含KAPA Express Extract（一种新型热稳定蛋白酶）、缓冲系统（能够在短短15分钟内从小鼠组织中提取出颗粒剂用于PCR的DNA）以及含染料的KAPA2G快速基因分型混合物，其中，混合物含有的DNA聚合酶通过定向进化技术改造而具有高持续性和超高速。KAPA Express Extract和KAPA2G快速基因分型混合物的组合可在低至1小时内从小鼠组织中可靠地提取和扩增DNA片段，而传统方案则需要超过1天的时间。KAPA2G Fast基因分型混合物（2X）是一种即用型预混合液，其中包含用于快速PCR的所有组分和稳定剂，以及除引物和模板外的两种惰性染料。
应用
KAPA2G Fast HotStart®基因分型混合物已被用于：
- 基因组DNA提取和PCR预混液的制备
- 从小鼠尾巴、耳朵和脚趾组织中提取和扩增
- 其他动物组织DNA的提取和扩增
生化/生理作用
KAPA2G Fast基因分型混合物产生的DNA片段进行3′-dA-tailed处理，并可克隆进TA克隆载体，或用于常规下游分析或应用，包括限制酶消化、克隆和测序。和野生型Taq一样，KAPA2G Fast 具有 5'→3'聚合酶和 5'→3'核酸外切酶活性，但是没有3'→5'核酸外切酶（校正）活性。KAPA2G Fast的精确性与野生型Taq相近；错配率约为每结合1.7 x 105个核甘酸错配1次。和依赖蛋白酶K消化的现有方案不同，采用KAPA Express Extract试剂盒可以在单个试管中方便地进行萃取，无需使用危险的化学物质或多个洗涤步骤。
特点和优势
提高生产能力、周转时间时间和可靠性：
优于粗提取方法和商业试剂盒：
快速提示：
- PCR-ready DNA 只需 15 分钟即可生成
- 最低限度的处理，从而降低样本丢失或污染的风险
- 有充足模板用于多种测定；易于缩放，以处理 96 孔格式的样本
- 快速可靠地扩增各种扩增子长度和GC含量各异的DNA片段
优于粗提取方法和商业试剂盒：
- 周转时间增加
- 特异性增强
- 成本降低
快速提示：
- 15 分钟从小鼠尾、耳或趾组织中提取 PCR-ready DNA
- PCR 前在 10 mM Tris-HCl (pH 8.0-8.5) 中稀释 DNA 提取物 10 倍，用 1μL DNA/25μL 反应。
- 提取液在-20℃ 下可稳定储存 6 个月以上。
- KAPA2G快速(热启动) 基因分型混合物包含用于快速 PCR 的工程化 KAPA2G快速DNA 聚合酶，以及缓冲液、MgCl2 (1.5 mM，1X) 和 dNTP (每种0.2 mM，1X)。
- 电泳上样染料包含在 KAPA2G 快速基因分型混合物中，可将 PCR 产物直接上样到琼脂糖凝胶上进行分析。
- 对于 1 kb 的扩增子，使用 15 s 退火时间，15 s 延长时间；对于更长的扩增子，使用 15-30 s/kb 延长时间。
包装
- 2X KAPA2G 快速标准或热启动基因分型混合物（含染料）
有时干冰运输，某些地区的运输条件可能不同。
质量
KAPA2G Fast HotStart Mouse Genotyping Kits 包含的所有组分均经过严格的质量控制检测，无污染的外切和内切酶活性，符合 DNA 污染的严格要求。
制备说明
使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下，以供短期使用（最长1个月）。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染，试剂盒在室温下放置短时间（最长3天）预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意，储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。
其他说明
仅供研究使用。不不用于诊断操作。
法律信息
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
警示用语：
Warning
危险声明
危险分类
STOT SE 2
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
法规信息
含少量动物源组分生物产品
常规特殊物品
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PLoS ONE, 12(12), e0190253-e0190253 (2017)
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Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is characterized by marked fibrosis and low immunogenicity, features that are linked to treatment resistance and poor clinical outcomes. Therefore, understanding how PDAC regulates the desmoplastic and immune stromal components is of great clinical importance. We
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商品
An overview of directed evolution and the methods for generating proteins with optimized or entirely new functions.
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