抗-蛋白C亲和基质

蛋白C是维生素K依赖性血浆酶原，由凝血酶-凝血酶调节蛋白复合物通过蛋白水解裂解激活，形成抗凝酶。抗-蛋白C小鼠单克隆抗体（克隆号HPC4）可特异性结合含蛋白C凝血酶切割位点的表位序列，并已固定化。抗-蛋白C抗体识别编码蛋白C重链6-17个残基的12氨基酸序列(EDQVDPRLIDGK)。抗-蛋白C抗体/蛋白C表位复合物需要在钙离子存在的条件下形成。在Ca²存在下，该抗体高亲和与高特异性地结合天然人蛋白C或带有该表位的蛋白质中的这一序列。无论该表位位置如何（N末端、C末端或内部），重组融合蛋白均可进行高效结合。因此，这种独特抗体尤其适合纯化带蛋白C表位标记的重组融合蛋白。

• 插入的蛋白C标记没有引入新的金属离子结合位点。Ca²⁺结合位点在抗体上。
• 蛋白C标记可任意掺入到融合蛋白的N端、C端或内部位置，而不会对抗体特异性有任何影响。
• 使用经济的钙螯合剂（如EDTA）或专用的蛋白C标记肽，可在非变性的温和洗脱条件下进行快速地免疫亲和纯化。

抗-蛋白C小鼠单克隆抗体（克隆号HPC4）可共价偶联琼脂糖珠。在偶联反应中，4mg抗体和1ml珠子反应。

抗-蛋白C亲和基质可用于：

• 来自哺乳动物、细菌和酵母细胞提取物的蛋白C标记蛋白的免疫沉淀
• 蛋白粗提液来源蛋白C标记蛋白的亲和柱纯化

在免疫沉淀或纯化之后，感兴趣的标记蛋白可以用于下列分析：

• 使用抗-蛋白C抗体进行蛋白质免疫印迹分析(Western blotting)
• 银染色（或类似的蛋白染色）

抗蛋白C抗体识别编码蛋白C重链6-17个残基的12氨基酸序列EDQVDPRLIDGK。在Ca²存在下，该抗体高亲和与特异性地结合天然人蛋白C或标记该表位的蛋白质中的这一序列。无论该表位位置如何（N末端、C末端或内部），重组融合蛋白均可进行高效结合。

• 洗脱条件温和，采用EDTA等钙螯合剂。
• 对蛋白C来源的EDQVDPRLIDGK序列具有高特异性。
• 抗蛋白抗体与蛋白C表位的结合依赖于钙离子的存在。
• 无论融合的蛋白C标记位于N末端、C末端还是内部，融合蛋白均适合进行纯化。
• 适用于来自哺乳动物、细菌和酵母表达系统的细胞粗提液。

内容物
1.该抗体共价偶联琼脂糖珠，是由1ml微珠和1ml缓冲液组成的浆液。
2.在偶联反应中，每ml微珠与4mg抗体反应。
3.一个塑料柱，含顶端和底部盖子。

1个试剂盒包含纯化树脂(settled resin)和柱子

1 ml抗蛋白C亲和基质（settled resin）悬液含20 mM Tris、0.1 M NaCl、1 mM CaCl₂和0.09%叠氮化钠(w/v)；2 ml悬液相当于1ml柱床体积。一个塑料柱，包含顶端和底部的盖子。

K_D = 10^–9 M，结合能力为2-10 nmol/ml亲和基质。使用含有蛋白C标记的β-半乳糖苷酶的全细胞细菌提取液进行纯化，产率为10.5 nmol纯化蛋白/ml亲和基质。

每一批次的抗-蛋白C亲和基质都经过纯化能力测试，即从细菌粗提液中纯化转化细菌表达的蛋白C标记蛋白。抗体亲和柱可结合蛋白质印迹和/或银染色分析。

仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。