质量水平
检测方案
>98% (SDS-PAGE)
用途
sufficient for 192 tests
包装
kit of 1
制造商/商品名称
Roche
技术
ELISA: suitable
储存温度
2-8°C
一般描述
hGH ELISA试剂盒专一检测人生长激素(hGH)。不会与大鼠生长激素发生交叉反应。没有检测过与人同源物TSH、FSH和LH的交叉反应。试剂盒提供hGH蛋白(来源于大肠杆菌)用于绘制标准曲线,附有免疫法测定的批次特定含量数据。
hGH标准品
试剂盒提供hGH蛋白(来源于大肠杆菌)用于绘制标准曲线,附有免疫法测定的批次特定含量数据。
hGH标准品
试剂盒提供hGH蛋白(来源于大肠杆菌)用于绘制标准曲线,附有免疫法测定的批次特定含量数据。
人生长激素(hGH)分析系统与其他常用报告蛋白(CAT、β-Gal或荧光素酶)的关键区别在于:hGH属分泌型蛋白,检测的是培养基上清液样本,因此:(i)无需裂解细胞,(ii)可连续监测瞬时表达动态,并且(iii)检测后细胞还可用于其他用途(如RNA分离)。此外,人生长激素(hGH)是哺乳动物基因,可能有助于hGH mRNA在大多数哺乳动物细胞中的超高稳定性。
采用标准的同位素实验方案,根据细胞类型和检测方法的灵敏度,可在转染约24小时后监测分泌到培养基上清液中的hGH蛋白。通常采用免疫放射分析法(IRMA)定量测定hGH,线性检测范围约为0.1-50ng hGH/ml。
采用标准的同位素实验方案,根据细胞类型和检测方法的灵敏度,可在转染约24小时后监测分泌到培养基上清液中的hGH蛋白。通常采用免疫放射分析法(IRMA)定量测定hGH,线性检测范围约为0.1-50ng hGH/ml。
特异性
该hGH ELISA特异性检测人生长激素(hGH),不会与大鼠生长激素发生交叉反应。
应用
仅供研究使用。不可用于诊断程序。
hGH ELISA用于定量测定真核细胞(用含编码hGH的报告基因的质粒转染)培养上清液中释放出的hGH表达水平。
hGH ELISA用于定量测定真核细胞(用含编码hGH的报告基因的质粒转染)培养上清液中释放出的hGH表达水平。
特点和优势
- 标准化:可直接比较不同组实验的数据(即使使用不同生产批次的试剂盒)
- 更灵敏:hGH ELISA法的检测灵敏度约为hGH同位素法的20倍。
- 更专一:hGH ELISA与大鼠生长激素无交叉反应
- 更快速:尽早测定hGH表达水平(转染后18小时),整个过程仅需大约4小时。
- 易于使用:遵循标准的ELISA实验方案
包装
1 个试剂盒包含 9 种组份。
产品规格
检测时间:约4小时
样本材料:培养上清液
灵敏度:≥5pg/ml (≥1pg/well)
标准品:试剂盒提供hGH蛋白(来源于大肠杆菌)用于绘制标准曲线,附有免疫法测定的批次特定含量数据。
样本材料:培养上清液
灵敏度:≥5pg/ml (≥1pg/well)
标准品:试剂盒提供hGH蛋白(来源于大肠杆菌)用于绘制标准曲线,附有免疫法测定的批次特定含量数据。
原理
hGH ELISA人生长激素检测试剂盒采用的是夹心酶联免疫吸附检测技术(ELISA)。微孔板孔表面预结合hGH抗体(抗hGH)。首先在微孔板孔中加入含分泌型hGH的培养上清液,所有hGH均结合孔表面的hGH抗体。接着加入地高辛标记的hGH抗体(抗hGH-DIG),与hGH结合。下一步加入过氧化物酶标记的地高辛抗体(抗DIG-POD),与地高辛结合。最后,加入过氧化物酶底物ABTS。过氧化物酶可催化底物裂解生成有色反应产物。使用ELISA酶标仪(微孔板读板机)测定样本吸光度,吸光度值与培养上清液中的hGH水平成正比。采用含底物增强剂的过氧化物酶底物(ABTS)可提高检测灵敏度。
制备说明
工作溶液:溶液1 hGH储液(瓶1)
用0.5 ml双蒸水重悬冻干剂。根据标签上的批次特定数据计算蛋白浓度(终浓度约为10 ng/ml)。该溶液用于制备hGH标准品,建立hGH校准曲线(参见说明书7.2节:hGH标准品制备)。
溶液2 抗hGH-DIG(瓶2)
用0.5 ml双蒸水重悬冻干剂(终浓度100 μg/ml)。
溶液2a 抗hGH-DIG工作稀释液
配制抗hGH-DIG工作稀释液时,用样本缓冲液(溶液7)稀释抗hGH-DIG溶液(100 g/ml)至1 μg/ml的终浓度((例如,100 μl重悬抗hGH-DIG溶液 + 9.9 ml溶液7,50孔)。工作稀释液应在临用前新鲜配制,不可储存。
溶液3 抗DIG-POD(瓶3)
用0.5 ml双蒸水重悬冻干剂(终浓度20 U/ml)。切勿添加叠氮化钠!
溶液3a 抗DIG-POD工作稀释液
制备抗DIG-POD工作稀释液时,用样本缓冲液(溶液7)稀释重悬抗DIG-POD溶液(20 U/ml)至终浓度200 mU/ml(例如, 100 μl 重悬抗DIG-POD溶液 + 9.9 ml溶液7,50孔)。工作稀释液应在用前现配,不可储存。
溶液4 POD底物(瓶4)
即用型溶液。
溶液5 POD底物,含底物增强剂(瓶4和5)
如预计样本中的hGH浓度偏低时,则向每ml溶液4中添加1 mg底物增强剂(瓶5),15-25 °C搅拌30 min混匀。溶液仅能稳定2小时,因此需在用前现配。切记,仅在hGH浓度偏低时添加底物增强剂!
溶液6 洗涤缓冲液,1×(瓶6)
配制即用型洗涤缓冲液时,将1份10x浓缩洗涤缓冲液(瓶6)与9份双蒸水混合。
溶液7 样本缓冲液(瓶7)
该溶液可直接使用。临用前充分混匀。请勿添加叠氮化钠。
储存条件(工作溶液):溶液1 hGH储液(瓶1)
该重悬液2-8°C可稳定存放2个月。如需长期保存,在-15至-25°C或以下分装储存。
溶液2 抗hGH-DIG(瓶2)
该重悬液2-8°C可稳定存放2个月。如需长期保存,在-15至-25°C或以下分装储存。
溶液2a 抗hGH-DIG工作稀释液
该工作稀释液应在临用前新鲜配制,不可储存。
溶液3 抗DIG-POD(瓶3)
该重悬液2-8°C可稳定存放6个月。切勿冻存!
溶液3a 抗DIG-POD工作稀释液
该工作稀释液应在临用前新鲜配制,不可储存。
溶液4 POD底物(瓶4)
该溶液2-8 °C储存时,在标签所示有效期之前均稳定。
POD底物,含底物增强剂(瓶4和5)
溶液仅能稳定2小时,因此需在用前现配。
溶液6 洗涤缓冲液,1×(瓶6)
该复溶液可在2-8°C下稳定存放6个月。
溶液7 样本缓冲液(瓶7)
由于溶液不含防腐剂,建议开瓶后在-15至-25 °C下分装储存。
用0.5 ml双蒸水重悬冻干剂。根据标签上的批次特定数据计算蛋白浓度(终浓度约为10 ng/ml)。该溶液用于制备hGH标准品,建立hGH校准曲线(参见说明书7.2节:hGH标准品制备)。
溶液2 抗hGH-DIG(瓶2)
用0.5 ml双蒸水重悬冻干剂(终浓度100 μg/ml)。
溶液2a 抗hGH-DIG工作稀释液
配制抗hGH-DIG工作稀释液时,用样本缓冲液(溶液7)稀释抗hGH-DIG溶液(100 g/ml)至1 μg/ml的终浓度((例如,100 μl重悬抗hGH-DIG溶液 + 9.9 ml溶液7,50孔)。工作稀释液应在临用前新鲜配制,不可储存。
溶液3 抗DIG-POD(瓶3)
用0.5 ml双蒸水重悬冻干剂(终浓度20 U/ml)。切勿添加叠氮化钠!
溶液3a 抗DIG-POD工作稀释液
制备抗DIG-POD工作稀释液时,用样本缓冲液(溶液7)稀释重悬抗DIG-POD溶液(20 U/ml)至终浓度200 mU/ml(例如, 100 μl 重悬抗DIG-POD溶液 + 9.9 ml溶液7,50孔)。工作稀释液应在用前现配,不可储存。
溶液4 POD底物(瓶4)
即用型溶液。
溶液5 POD底物,含底物增强剂(瓶4和5)
如预计样本中的hGH浓度偏低时,则向每ml溶液4中添加1 mg底物增强剂(瓶5),15-25 °C搅拌30 min混匀。溶液仅能稳定2小时,因此需在用前现配。切记,仅在hGH浓度偏低时添加底物增强剂!
溶液6 洗涤缓冲液,1×(瓶6)
配制即用型洗涤缓冲液时,将1份10x浓缩洗涤缓冲液(瓶6)与9份双蒸水混合。
溶液7 样本缓冲液(瓶7)
该溶液可直接使用。临用前充分混匀。请勿添加叠氮化钠。
储存条件(工作溶液):溶液1 hGH储液(瓶1)
该重悬液2-8°C可稳定存放2个月。如需长期保存,在-15至-25°C或以下分装储存。
溶液2 抗hGH-DIG(瓶2)
该重悬液2-8°C可稳定存放2个月。如需长期保存,在-15至-25°C或以下分装储存。
溶液2a 抗hGH-DIG工作稀释液
该工作稀释液应在临用前新鲜配制,不可储存。
溶液3 抗DIG-POD(瓶3)
该重悬液2-8°C可稳定存放6个月。切勿冻存!
溶液3a 抗DIG-POD工作稀释液
该工作稀释液应在临用前新鲜配制,不可储存。
溶液4 POD底物(瓶4)
该溶液2-8 °C储存时,在标签所示有效期之前均稳定。
POD底物,含底物增强剂(瓶4和5)
溶液仅能稳定2小时,因此需在用前现配。
溶液6 洗涤缓冲液,1×(瓶6)
该复溶液可在2-8°C下稳定存放6个月。
溶液7 样本缓冲液(瓶7)
由于溶液不含防腐剂,建议开瓶后在-15至-25 °C下分装储存。
分析说明
与大鼠生长激素无交叉反应。没有检测过与人同源物TSH、FSH和LH的交叉反应。
其他说明
仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- hGH (human growth hormone)
- Anti-hGH-digoxigenin (anti-hGH-DIG) antibody, lyophilizate
- Anti-Digoxigenin-POD antibody, lyophilizate
- POD Substrate ready-to-use
- Substrate Enhancer
- Washing Buffer 10x concentrated
- Sample Buffer
- Microplates (24x8 wells), precoated with anti-hGH (2)
- Self-adhesive Plate Cover Foils (6)
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警示用语:
Warning
危险声明
危险分类
Aquatic Chronic 3 - Eye Irrit. 2 - Skin Sens. 1
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 3
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
法规信息
含少量动物源组分生物产品
常规特殊物品
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Scientific reports, 11(1), 15624-15624 (2021-08-04)
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Neuroscience letters, 444(3), 240-244 (2008-09-02)
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