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形式
solution
质量水平
用途
sufficient for 50 labeling reactions
包装
pkg of 100 μL
制造商/商品名称
Roche
技术
Northern blotting: suitable
Southern blotting: suitable
cDNA synthesis: suitable (first strand)
hybridization: suitable
颜色
colorless
溶解性
water: miscible
储存温度
−20°C
一般描述
方便的寡核苷酸混合物，用于放射性、地高辛或生物素标记的核苷酸快速随机引物标记 DNA。Klenow 聚合酶合成互补 DNA 链-作为引物的随机寡核苷酸的 OH 末端。
特异性
热灭活：通过加入2μl 0.2MEDTA (pH 8.0) 和/或加热至 65°C 10 分钟来停止反应。
应用
Hexanucleotide Mix 是所有可能序列的六聚体核苷酸混合物，用于随机引物 DNA 标记。
高比活性的 DNA 标记探针用于多种杂交技术：
高比活性的 DNA 标记探针用于多种杂交技术：
- 基因文库的筛选
- Southern 和 northern 印迹
- 原位 杂交
- RT-PCR
- cDNA文库的生成
- 第一链cDNA的合成
- 载体滴度测定中
- 第二链合成
特点和优势
本品为 10x 浓度的随机己酸核苷酸混合物。从统计学上看，混合物可能含有多达 4096 种不同的己酸核苷酸，但这些核苷酸的含量可能不同。
内容物
反应缓冲液中的环己核苷酸（62.5 A260 单位/ml）的 10x 浓缩混合物[0.5M Tris-HCl，0.1M MgCl2，1 mM 二硫赤藓糖醇 (DTE)，2 mg/mL BSA，pH 7.2 (+ 20 ℃)]
注： 混合物与 DIG DNA 标记和检测试剂盒的小瓶 5 和 DIG DNA 标记试剂盒的小瓶 5 以及随机引物 DNA 标记试剂盒的小瓶 6 中提供的完全相同。
内容物
反应缓冲液中的环己核苷酸（62.5 A260 单位/ml）的 10x 浓缩混合物[0.5M Tris-HCl，0.1M MgCl2，1 mM 二硫赤藓糖醇 (DTE)，2 mg/mL BSA，pH 7.2 (+ 20 ℃)]
注： 混合物与 DIG DNA 标记和检测试剂盒的小瓶 5 和 DIG DNA 标记试剂盒的小瓶 5 以及随机引物 DNA 标记试剂盒的小瓶 6 中提供的完全相同。
质量
在随机引物 DNA 标记试剂盒中检测的功能。
原理
Feinberg 和 Vogelstein 开发的“随机引物”DNA 标记方法是基于所有可能的己核苷酸与待标记 DNA 的混合物进行杂交。所有序列组合在六核苷酸引物混合物中表示，这导致引物以统计方式与模板 DNA 结合。因此，保证沿模板 DNA 全长的标记程度相等。互补链采用 Klenow 酶，标记级，从随机六核苷酸引物的 3'-OH 末端合成。反应中存在的修饰脱氧核苷三磷酸（[32P]、[35S]、[3H] 或 [125I] 地高辛或生物素标记）掺入新合成的互补 DNA 链。
制备说明
检测时间
标记（放射性）：50 min
地高辛-11-dUTP 标记试验：80 min
样品材料
合成： 所有 4 个碱基均用于合成该随机六核苷酸混合物。在最初的反应中，起始核苷酸连接到固相载体。在随后的偶联反应中，等摩尔量的 4 dNTP 与起始核苷酸连接，直到生成六聚体。然后从固相载体中释放六聚体。
寡核苷酸经 HPLC 纯化、脱盐和 5′-磷酸化。
标记（放射性）：50 min
地高辛-11-dUTP 标记试验：80 min
样品材料
- DNA 片段
- 线性化质粒 DNA
- λDNA
合成： 所有 4 个碱基均用于合成该随机六核苷酸混合物。在最初的反应中，起始核苷酸连接到固相载体。在随后的偶联反应中，等摩尔量的 4 dNTP 与起始核苷酸连接，直到生成六聚体。然后从固相载体中释放六聚体。
寡核苷酸经 HPLC 纯化、脱盐和 5′-磷酸化。
分析说明
吸收： 62.5 A260 单位相当于 2.5 mg/mL 己酸核苷酸。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
WGK
WGK 1
闪点(°F)
No data available
闪点(°C)
No data available
法规信息
含少量动物源组分生物产品
常规特殊物品
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