CpGenome通用未甲基化DNA

CpGenome 通用未甲基化DNA组为基因甲基化研究提供了2个单独的基因组DNA对照。该产品预期与CpGenome DNA修饰试剂盒（S7820）配合使用，随后可用作基因甲基化研究的非甲基化DNA对照。



提供的材料：

通用非甲基化DNA小瓶A含有浓度为0.1 μg/μL的5微克（50μL）人基因组DNA。通用未甲基化DNA小瓶B含有从原代人胎儿细胞系分离的5微克（50μL）基因组DNA，浓度为0.1 μg/μL。注意：必须首先使用（S7820）对DNA进行亚硫酸氢盐修饰，以使用针对目的基因的未甲基化形式的特异性引物组。



验证：

亚硫酸氢盐修饰后，对DNA进行甲基化特异性PCR(MSP)。 在测定中使用了来自CpG WIZ产品线的各种引物组。 小瓶A的DNA已用几种CpG WIZ扩增试剂盒的引物进行了验证。 小瓶B DNA在使用CpG WIZ试剂盒测定的几个启动子上也未甲基化，并作为可能在小瓶A DNA中部分甲基化的启动子的DNA替代来源提供。



CpG基因组和CpG WIZ甲基化产品应用技术，该技术已获得约翰霍普金斯大学医学院的独家许可。甲基化特异性PCR(MSP)技术由美国专利#5,786,146涵盖。

经5′端的胞嘧啶甲基化为鸟嘌呤对许多真核基因的表达具有深远的影响。在正常细胞中，甲基化主要发生在CG贫乏区域，而富含CG的区域（称为CpG岛）则保持未甲基化状态。其中例外的是，CpG岛的广泛甲基化与印记基因和女性无活性X染色体上的基因调节区的转录失活有关。在永生化和转化的细胞中，正常未甲基化的CpG岛的异常甲基化已被报道为一个相对频繁的事件，并且与人类癌症中已定义的肿瘤抑制基因的转录失活有关。目前已知数百个CpG岛在肿瘤中表现出高甲基化的特征。
已经开发了几种方法来确定胞嘧啶的甲基化状态。这些包括用甲基化敏感的限制酶消化，如限制性标志基因组扫描，寡核苷酸阵列，基因组DNA测序和甲基化特异性PCR(MSP)。一些技术对于发现更有用，而其他技术则更好地用于监测已知的甲基化胞嘧啶。虽然基因组DNA测序费时费力，但提供了一种更通用的检测方法。MSP现在是用于监测所选基因序列中异常基因甲基化的既定技术。该程序利用少量DNA，可灵敏并特异地检测启动子中的5-甲基胞嘧啶。它被用来定义肿瘤抑制基因的功能，并为早期肿瘤检测提供新的策略。
基因组测序和MSP的初始步骤是对DNA样品进行亚硫酸氢盐修饰。然后，MSP涉及使用特定引物进行PCR扩增，这些引物旨在区分甲基化和未甲基化的DNA。

2 x 5 μg

在TE（10mM Tris-HCL，0.1mM EDTA）中的液体，不含防腐剂。

建议储存： -15°C至-25°C，等分分装，自接收之日起保存长达2年，避免冻融。相同的-20°C等分试样的冷冻和解冻不要超过3倍，以获得最佳结果。多次冻融可使DNA片段化。在-70°C下保存，必要时可长期保存；尽量减少多次冻融，以获得最佳结果。

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