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用途
sufficient for 50 tests
质量水平
种属反应性（根据同源性预测）
all
制造商/商品名称
Calbiochem®
储存条件
OK to freeze
技术
microbe id | specific enzyme detection: suitable
输入
sample type paraffin section(s)
sample type frozen section(s)
sample type fixed-cell preparation(s)
检测方法
colorimetric
储存温度
−20°C
一般描述
用于检测单个细胞水平凋亡的非同位素试剂盒。易于检测凋亡形态。该试剂盒可以识别石蜡包埋的组织切片、组织冷冻切片或通过片段末端标记（FragEL）的DNA固定在玻片上的细胞制剂中的凋亡核。末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）可结合响应凋亡信号而产生的DNA片段的暴露末端，并催化生物素标记的和未标记的脱氧核苷酸的模板依赖性加成。使用链霉亲和素-辣根过氧化物酶（HRP）缀合物对生物素化的核苷酸进行检测。二氨基联苯胺可与标记的样品反应，在DNA断裂位点产生不溶的有色产物。用甲基绿复染有助于对正常细胞和凋亡细胞的形态进行评估和表征。
组分
复染、蛋白酶K、平衡和标记缓冲液、TdT酶（货号PF060）、终止缓冲液、封闭缓冲液、50X缀合物、DAB、阳性和阴性对照载玻片、H₂O₂/尿素片、甲基绿复染剂、和用户操作步骤。
警告
毒性：多个毒性值，参见MSDS（O）
原理
Calbiochem TdT-FragEL DNA碎片检测试剂盒是一种非同位素系统，可用于标记石蜡包埋的组织切片、组织冷冻切片以及固定在载玻片上的细胞制剂中凋亡核中的DNA断裂。
制备说明
1.阴性对照样品的获得通过在反应步骤中用dH2O代替反应混合物中的TdT或在标记步骤中将样品保存在1X反应缓冲液（带盖玻片）中，可以获得特定样品的阴性对照。按照说明进行所有其他步骤。这可以控制内源性过氧化物酶和非特异性结合物的结合。非细胞凋亡对照也至关重要，因为细胞和组织从切除、固定和加工步骤的最开始就开始发生凋亡。固定或常规机械操作的延迟可能会导致不必要的DNA断裂，这可能被误认为是凋亡。2.阳性对照样品的获得：蛋白酶K处理后，在1X TBS/1 mM MgSO4中用1 µg/µl DNase I覆盖整个样本，即可获得特定组织样品的阳性对照。在室温下孵育20分钟。按照说明进行所有其他步骤。这将使正常细胞中的DNA断裂。可以观察到DNase处理过的细胞的细胞质和核的DAB染色。
储存及稳定性
收到货后将试剂盒的全部内容物储存在-20°C的无霜冰箱中。初次融化后，将终止缓冲液和甲基绿复染液在室温下保存，将封闭缓冲液在4°C下保存。但是，重新冷冻这些组分可能并不会影响它们的性能。
其他说明
Xiao, D. and Bullock, R. 1996.J. Neurosurgery85, 655.
Gu, Y., et al. 1994.Endocrinology135, 1272.
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法律信息
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
警示用语：
Danger
危险分类
Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - Carc. 1B - Eye Dam. 1 - Muta. 2 - Ox. Liq. 3 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1 - STOT RE 2 Inhalation
靶器官
Respiratory Tract
储存分类代码
5.1B - Oxidizing hazardous materials
法规信息
监管及禁止进口产品
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