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用途
sufficient for 96 tests
质量水平
包装
pkg of 1 96-well plate(s)
制造商/商品名称
Calbiochem®
储存条件
OK to freeze
avoid repeated freeze/thaw cycles
protect from light
输入
sample type serum
sample type plasma
sample type cell lysate
检测方法
fluorometric
运输
wet ice
一般描述
钙蛋白酶是 Ca2+ 依赖性蛋白酶，其参与正常的细胞过程，包括细胞增殖、凋亡、分化和细胞迁移。需要能够在最大发射波长下测量荧光的荧光计或酶标仪：〜360 nm 和最大发射波长：~460 nm.
组分
校准标准品、阳性对照钙蛋白酶 1、底物、活化缓冲液、抑制缓冲液、还原剂、检测缓冲液、细胞裂解缓冲液、96 孔板、平板密封剂和说明书。
警告
毒性：多个毒性值，请参阅 MSDS（O）
产品规格
试验时间：1.5 h
制备说明
1.细胞裂解液：用冷的 PBS 洗涤细胞沉淀。b.加入 500-1000 µl 裂解缓冲液（每 1 x 107 细胞约 1 ml）并在冰上孵育 30 分钟。c.涡旋振荡并在预冷的台式微量离心机中以 14,000 x g 离心裂解液。d.立即将上清液转移至新的试管中并弃去沉淀物。e.在使用 BCA 蛋白质测定法测定蛋白质浓度之前，将裂解液至少以 1:10 稀释。2.如有必要，用检测缓冲液稀释样品。通常，蛋白质浓度 > 3 mg/ml 的细胞裂解液应稀释 5 倍。如果测得的 RFU 超过 6000，则应进一步稀释样品。
注意：该试剂盒提供了进行检测所需的所有试剂。使用前，将所有组件（对照钙蛋白酶 1 除外）加热至 15-25°C（室温）；将对照钙蛋白酶 1 存放在冰上，直至使用。为了获得最佳结果，仅在需要时才制备试剂稀释液。 • 稀释标准：AMC 标准品以 1 mM 的储备溶液（100X 浓缩溶液）的形式提供。要制备校准曲线，请使用浓度范围为 0.625-10 µM 的标准品进行系列稀释液。示例：标记 6 个 eppendorf 管。用移液器吸取 495 µM 检测缓冲液到第一个试管中，然后将 200 µl 移入其余试管中。在第一个试管中加入 5 µl AMC 标准品。涡旋并从该试管转移 200 µl 至下一个试管。通过将 200 µl 转移到连续的试管中直至试管 5 继续进行连续稀释。标记为 6 的试管仅包含检测缓冲液（空白）。 • 稀释的底物：用检测缓冲液将底物稀释 100 倍。示例：制备足够进行 6 次连续稀的底物，使用 30 µl 底物 ，添加 2.97 ml 检测缓冲液进行稀释 。•活化缓冲液（最终）：还原试剂（TCEP）必须在使用前添加到活化缓冲液中。示例：要制备活化缓冲液（最终），添加 20 µl 还原剂，5 ml 活化缓冲液。 • 对照钙蛋白酶 1：按照小瓶标签上的指示使用检测缓冲液稀释对照钙蛋白酶 1。要保持活性，对照钙蛋白酶 1 应该储存于 -70°C 。解冻并稀释后，应立即使用；稀释的酶可以在冰上保存数小时。
储存及稳定性
自收到之日起，将对照人钙蛋白酶 1 储存于 -70°C，其余组件储存于 -20°C。除了对照人钙蛋白酶 1，所有组件一旦打开，都可以在 4°C 下保存长达 1 个月。
分析说明
阳性对照
钙蛋白酶 1
钙蛋白酶 1
其他说明
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法律信息
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警示用语：
Danger
危险声明
危险分类
Repr. 1B
储存分类代码
6.1C - Combustible acute toxic Cat.3 / toxic compounds or compounds which causing chronic effects
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