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生物来源
mouse
质量水平
抗体形式
purified antibody
抗体产品类型
primary antibodies
克隆
IF2, monoclonal
形式
liquid
包含
≤0.1% sodium azide as preservative (100 μg only)
种属反应性
human
请勿与下列物质发生反应
mouse
制造商/商品名称
Calbiochem®
储存条件
do not freeze
同位素/亚型
IgG2b
运输
wet ice
储存温度
2-8°C
靶向翻译后修饰
unmodified
基因信息
human ... MDM2(4193)
mouse ... Mdm2(17246)
一般描述
可识别~90 kDa（表观分子量）MDM2蛋白。也可通过免疫印迹识别~57 kDa和~74/76 kDa的亚型。
纯化的小鼠单克隆抗体（参见应用参考文献）。可识别~90 kDa（表观分子量）MDM2蛋白。也可识别~57和~74/76 kDa的亚型。
该抗MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）经验证可用于冰冻切片、免疫印迹、免疫荧光、免疫沉淀、石蜡切片中检测MDM2（Ab-1）。
免疫原
人
人MDM2
表位：人MDM2的氨基酸26-169内
应用
冰冻切片（1-5 µg/ml，见应用参考文献）
免疫印迹（0.5-2 µg/ml，化学发光）
免疫荧光（1-5 µg/ml）
免疫沉淀（1 µg/样品）
石蜡切片（1-5 µg/ml，需要加热预处理，见应用参考文献）
免疫印迹（0.5-2 µg/ml，化学发光）
免疫荧光（1-5 µg/ml）
免疫沉淀（1 µg/样品）
石蜡切片（1-5 µg/ml，需要加热预处理，见应用参考文献）
包装
请参考特定浓度批号的标签。
警告
毒性：标准处理（A）
外形
溶于50 mM磷酸钠缓冲液，含0.2％明胶。
分析说明
阳性对照
OSA-CL细胞
OSA-CL细胞
其他说明
Gorgoulis, V.G., et al. 1996.J. Pathol.180, 129.
Marchetti, A., et al. 1995.J. Pathol.175, 31.
Barak, Y., et al. 1993.EMBO J.12, 461.
Ladanyi, M., et al. 1993.Cancer Res.53, 16.
Leach, F.S., et al. 1993.Cancer Res.53, 2231.
Oliner, J.D., et al. 1993.Nature362, 857.
Momand, J., et al. 1992.Cell69, 1237.
Oliner, J.D., et al. 1992.Nature358, 80.
Fakharzadeh, S.S., et al. 1991.EMBO J. 10, 1565.
Marchetti, A., et al. 1995.J. Pathol.175, 31.
Barak, Y., et al. 1993.EMBO J.12, 461.
Ladanyi, M., et al. 1993.Cancer Res.53, 16.
Leach, F.S., et al. 1993.Cancer Res.53, 2231.
Oliner, J.D., et al. 1993.Nature362, 857.
Momand, J., et al. 1992.Cell69, 1237.
Oliner, J.D., et al. 1992.Nature358, 80.
Fakharzadeh, S.S., et al. 1991.EMBO J. 10, 1565.
尽管MDM2的氨基酸序列预测蛋白质分子量约为54 kDa，但MDM2蛋白质在SDS/PAGE上迁移的表观迁移率为90 kDa。
免疫印迹方案
MDM2（Ab-1）可用于通过蛋白质印迹法检测MDM2，该蛋白质先前已通过SDS/PAGE分离并电泳转移到硝酸纤维素膜上。蛋白质与单克隆抗体反应，并使用HRP标记的山羊抗小鼠抗体和化学发光检测进行可视化。
材料
设备：
•电泳仪
• 电印迹仪
• Rocker platform
溶液和试剂
• 抗-MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）目录编号OP46或OP46T
• HRP偶联山羊抗小鼠IgG重链和轻链（例如目录编号401215）
• 化学发光检测系统
• ELB缓冲液（包括蛋白酶抑制剂混合物，例如0.5 µg/ml亮肽素, 1 µg/ml胃酶抑素， 1 mM EDTA和0.2 mM PMSF）：50 mM Hepes pH 7.0，250 mM NaCl，0.5 mM EDTA，0.1% Nonidet P-40替代物
• SDS-PAGE（7%丙烯酰胺）
• 磷酸盐缓冲盐水（PBS）pH 7.4；1升：0.2 g KCl，0.2 g KH2PO4，8 g NaCl，1.15 g Na2HPO4
• PBS/0.1% Tween®-20洗涤剂（PBST）
• PBST中3%脱脂奶粉的
程序
1.在ELB缓冲液中裂解细胞。（或者，细胞可以在RIPA缓冲液中裂解或直接在1X Laemmli样品缓冲液中裂解）。
2.使用7%丙烯酰胺凝胶电泳50-100 µg裂解物。
3.使用电印迹仪将蛋白质样品从聚丙烯酰胺凝胶转移到硝酸纤维素膜上。
4.室温下通过摇摆将膜在含3%脱脂奶粉的PBST中封闭1 h。使用约1 ml/cm2的膜。
5.将膜与溶于3%脱脂奶粉/PBST中的1 µg/mL抗MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）在室温下摇晃孵育1小时。
6.室温下在PBST中摇动洗涤膜3次，每次15分钟。
7.将膜与HRP标记的山羊抗小鼠IgG重链和轻链抗体（根据供应商’说明稀释）在3%脱脂奶粉/PBST中于室温下孵育1小时。
8.室温下在PBST中摇动洗涤膜4次，每次15分钟。
9.根据生产商的说明，使用化学发光检测试剂显影膜。
10.将膜暴露于膜10分钟。根据需要调整后续暴露时间。
免疫印迹方案
MDM2（Ab-1）可用于通过蛋白质印迹法检测MDM2，该蛋白质先前已通过SDS/PAGE分离并电泳转移到硝酸纤维素膜上。蛋白质与单克隆抗体反应，并使用HRP标记的山羊抗小鼠抗体和化学发光检测进行可视化。
材料
设备：
•电泳仪
• 电印迹仪
• Rocker platform
溶液和试剂
• 抗-MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）目录编号OP46或OP46T
• HRP偶联山羊抗小鼠IgG重链和轻链（例如目录编号401215）
• 化学发光检测系统
• ELB缓冲液（包括蛋白酶抑制剂混合物，例如0.5 µg/ml亮肽素, 1 µg/ml胃酶抑素， 1 mM EDTA和0.2 mM PMSF）：50 mM Hepes pH 7.0，250 mM NaCl，0.5 mM EDTA，0.1% Nonidet P-40替代物
• SDS-PAGE（7%丙烯酰胺）
• 磷酸盐缓冲盐水（PBS）pH 7.4；1升：0.2 g KCl，0.2 g KH2PO4，8 g NaCl，1.15 g Na2HPO4
• PBS/0.1% Tween®-20洗涤剂（PBST）
• PBST中3%脱脂奶粉的
程序
1.在ELB缓冲液中裂解细胞。（或者，细胞可以在RIPA缓冲液中裂解或直接在1X Laemmli样品缓冲液中裂解）。
2.使用7%丙烯酰胺凝胶电泳50-100 µg裂解物。
3.使用电印迹仪将蛋白质样品从聚丙烯酰胺凝胶转移到硝酸纤维素膜上。
4.室温下通过摇摆将膜在含3%脱脂奶粉的PBST中封闭1 h。使用约1 ml/cm2的膜。
5.将膜与溶于3%脱脂奶粉/PBST中的1 µg/mL抗MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）在室温下摇晃孵育1小时。
6.室温下在PBST中摇动洗涤膜3次，每次15分钟。
7.将膜与HRP标记的山羊抗小鼠IgG重链和轻链抗体（根据供应商’说明稀释）在3%脱脂奶粉/PBST中于室温下孵育1小时。
8.室温下在PBST中摇动洗涤膜4次，每次15分钟。
9.根据生产商的说明，使用化学发光检测试剂显影膜。
10.将膜暴露于膜10分钟。根据需要调整后续暴露时间。
法律信息
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
TWEEN is a registered trademark of Croda International PLC
WGK
nwg
Deborah J Luessen et al.
The Journal of biological chemistry, 294(38), 14068-14080 (2019-08-02)
Acute alcohol exposure alters the trafficking and function of many G-protein-coupled receptors (GPCRs) that are associated with aberrant behavioral responses to alcohol. However, the molecular mechanisms underlying alcohol-induced changes in GPCR function remain unclear. β-Arrestin is a key player involved
Yongliang Hu et al.
Oncogene, 38(5), 731-746 (2018-09-05)
Our previous studies revealed that GADD45α is a liable protein, which undergoes MDM2-dependent constitutive ubiquitination and degradation in resting HepG2 hepatoma cells. Arsenite exposure induces ribosomal stress responses mediated by the ribosomal protein S7, which can block MDM2 activity and
C Wasylyk et al.
Molecular and cellular biology, 20(15), 5554-5570 (2000-07-13)
The cell cycle arrest and proapoptotic functions of p53 are under tight control by Mdm2. After stress activation of p53 by nontranscriptional mechanisms, transcription of the mdm2 gene results in increased synthesis of Mdm2 and down-regulation of p53. Disruption of
Sharon Brookes et al.
The EMBO journal, 21(12), 2936-2945 (2002-06-18)
The CDKN2A tumour suppressor locus encodes two distinct proteins, p16(INK4a) and p14(ARF), both of which have been implicated in replicative senescence, the state of permanent growth arrest provoked in somatic cells by aberrant proliferative signals or by cumulative population doublings
Thomas J Huot et al.
Molecular and cellular biology, 22(23), 8135-8143 (2002-11-06)
The INK4a/ARF tumor suppressor locus is implicated in the senescence-like growth arrest provoked by oncogenic Ras in primary cells. INK4a and ARF are distinct proteins encoded by transcripts in which a shared exon is decoded in alternative reading frames. Here
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