抗-泛素（pan）抗体，克隆2G7B8

泛素（Ub）最初为含229个氨基酸的聚泛素B（UniProt P0CG47）前体蛋白，由UBB基因编码（基因ID：泛素（Ub），或者是含685个氨基酸的聚泛素C（UniProt P0CG48）前体蛋白，由人UBC基因（基因ID：7316）编码。翻译后切割产生多个拷贝的76个氨基酸的泛素（也称为高迁移率族非组蛋白HMG-20）分子。泛素化是细胞蛋白最常见的翻译后修饰（PTM）之一，其中Ub通过其羧基末端（Gly76）与靶蛋白中的Lys残基共价连接。在给定的靶点中Lys残基可以连接到一个单个Ub分子（单泛素化）或连接到Ub分子链（多泛素化）。在polyUb链中，Ub分子可以通过七个Lys残基之一（K6、K11、K27、K29、K33、K48和K63）或通过Ub N末端Met1残基（产生线性链）连接。Lys-C是一种内肽酶，可切割未修饰的赖氨酸残基的C末端侧的蛋白质，但不切割Ub修饰的赖氨酸残基，从而产生具有C末端赖氨酸和内部赖氨酸残基与Ub C连接的肽片段-末端残基（由于Ub K63和E64之间的Lys-C裂解）。特异性靶向该Ub C末端残基的抗体（即，如果K63在polyUb链中泛素化，则为E64至Gly76或E48至Gly76）与由University of Southern Denmark的Dr. Blagoy Blagoev实验室开发的用于确定赖氨酸泛素化位点的专利UbiSite®方法兼容。此类抗体可分离具有Ub修饰位点的Lys-C消化片段，然后进一步胰蛋白酶消化，以在质谱(MS)分析以确定赖氨酸修饰位点之前仅留下与分离的肽片段上的修饰赖氨酸共价连接的Gly75-Gly76。它们也利用 UbiSite® 技术识别经历HOIL-1催化泛素化反应的丝氨酸和苏氨酸残基。 据报道泛素的苏氨酸残基12、14、22和丝氨酸20与其它泛素分子的C末端羧酸形成酯键，从而增加了泛素连接键的类型。IRAK4的丝氨酸175和IRAK2 的丝氨酸136、168和苏氨酸168是HOIL-1催化泛素化反应的位点：（参考文献：McCrory, EH., et al. (2022)。Biochem. J. 479(23); 2419-2431; Akimov, V., et al. (2018)。Nat. Struct.Mol. Biol. 25(7):631-640)。

克隆2G7B8通过将Ub序列C末端靶向Lys63（UbiSite标记）来检测单泛素化（MonoUb）和多泛素化（polyUb）蛋白以及游离泛素（Ub）分子。克隆2G7B8可用于检测（例如，通过斑点印迹）和分离（即，通过免疫沉淀）来自内蛋白酶Lys-C消化后Ub修饰蛋白的肽。Lys-C在未修饰的赖氨酸残基后裂解Ub和Ub修饰的蛋白质，但不裂解Ub修饰的赖氨酸残基，从而生成肽片段，其修饰的赖氨酸残基与Ub C末端残基（UbiSite标记）相连，无法被表位位于Lys63的N末端的其他泛素抗体识别。然后可以对分离的肽片段进行质谱(MS)分析，以鉴定泛素修饰位点。

基于100%序列同源性，预期具有广泛的物种反应性。

KLH偶联线性肽，对应于来自人泛素的 C末端区域的13个氨基酸 。

表位：在C末端附近。

抗泛素（pan）（也称抗泛素，UbiSite，克隆2G7B8）是一种小鼠单克隆抗体，可检测泛素，还可用于蛋白质印迹和质谱。

研究子类别
泛素&泛素代谢

研究类别
信号传导

蛋白质印迹分析：在蛋白酶体抑制剂MG-132（目录号474790）处理后（由Blagoy Blagoev博士提供，University of Southern Denmark），1.0 µg/mL的代表性批次检测到HEp-2人上皮细胞中泛素化蛋白的累积。

通过蛋白质印迹法在HEp-2人上皮细胞裂解物中进行评价。

蛋白质印迹分析：2.0 µg/mL该抗体在10 µg HEp-2人上皮细胞裂解物中检测到泛素化蛋白。

取决于泛素化蛋白/肽的大小和泛素化程度。

形式：纯化

纯化的小鼠单克隆IgG1κ抗体，溶于含0.1 M Tris-甘氨酸（pH 7.4）、150 mM NaCl和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。

纯化蛋白G

自接收之日起，在2-8°C下可稳定保存1年。

浓度：请参考特定批次的数据表。

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