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Merck
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文件

MABC604

Sigma-Aldrich

抗-MLKL抗体,克隆3H1

clone 3H1, from rat

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别名:
Mixed lineage kinase domain-like protein, MLKL
UNSPSC代码:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

生物来源

rat

质量水平

抗体形式

purified antibody

抗体产品类型

primary antibodies

克隆

3H1, monoclonal

种属反应性

mouse

技术

immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

同位素/亚型

IgG

NCBI登记号

UniProt登记号

运输

wet ice

靶向翻译后修饰

unmodified

基因信息

mouse ... Mlkl(74568)

一般描述

MLKL,也称为混合谱系激酶结构域样蛋白,由基因MLKL编码,是执行程序性坏死或坏死性凋亡(例如响应TNF-α诱导的坏死)所需的有趣蛋白。MLKL是“necrosome”的一个组成部分,“necrosome”是一种多蛋白复合物,可通过坏死病触发肿瘤坏死因子(TNF)诱导的细胞死亡。TNF-α诱导的程序性坏死也需要受体相互作用的丝氨酸-苏氨酸激酶RIP1和RIP3的活性,它们也直接与混合谱系激酶结构域样蛋白MLKL相互作用。RIP3是坏死病中必不可少的上游激酶。假激酶MLKL充当RIP3的底物以介导下游信号传导,当与MLKL复合时,RIP3-MLKL复合物被AMP-PNP稳定以采用非活性构象。

免疫原

KLH偶联线性肽,对应于从小鼠MLKL的双螺旋接头(Brace)区域N末端到假激酶结构域的序列(Hildebrand,J.M.,et al.(2014).Proc.Natl.Acad.Sci. U.S.A.111(42):15072-15077; Murphy, J.M., et al. (2013).Immunity.39(3):443-453)。
表位:支架区域。

应用

免疫细胞化学分析:一个代表性批次在野生型小鼠真皮成纤维细胞(MDF)中检测到MLKL,但在MLKL-/-小鼠中未检测到(由James M. Murphy教授,Walter and Eliza Hall Institute, Australia提供)。

免疫沉淀分析: 一个代表性批次免疫沉淀MLKL来自MLKL-/-小鼠真皮成纤维细胞(MDF)的可溶性提取物,其含有多西环素诱导的野生型小鼠MLKL表达构建体,仅在多西环素处理之后而不是之前(Murphy,JM,et al.(2013).Immunity.39(3):443-453)。

蛋白质印迹分析:一个代表性批次检测到Q-VD-OPh(TSQ;目录号551476)处理诱导的鼠和马MLKL N末端片段(分别为a.a.1-180和1-189),其在来自MLKL-/-小鼠的小鼠真皮成纤维细胞(MDF)中外源表达(Tanzer, M.C., et al. (2016).Cell Death Differ..In press)。

蛋白质印迹分析:一个代表性批次在人HT-29和U937细胞中检测到MLKL(Tanzer,M.C.,et al.(2015).Biochem.J. 471(2):255-265)。

蛋白质印迹分析:一个代表性批次在Q-VD-OPh(TSQ;目录号551476)处理后在小鼠真皮成纤维细胞(MDF)中检测到MLKL膜移位(Tanzer,M.C.,et al.(2015).Biochem.J. 471(2):255-265; Hildebrand, J.M., et al. (2014).Proc.Natl.Acad.Sci. U.S.A.111(42):15072-15077)。

蛋白质印迹分析:一个代表性批次在L292小鼠成纤维细胞以及小鼠真皮成纤维细胞(MDF)、小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和来自野生型但非MLKL-/-小鼠的骨髓衍生巨噬细胞(BMDM)中检测到MLKL表达(Cook,WD,et al.(2014).Cell Death Differ.21(10):1600-1612; Murphy, J.M., et al. (2013).Immunity.39(3):443-453)。

蛋白质印迹分析:一个代表性批次检测到重组全长小鼠MLKL以及a.a.1-180和a.a.124-464,但不是a.a.1-125或a.a.179-464,MLKL片段(Hildebrand,J.M.,et al.(2014).Proc.Natl.Acad.Sci. U.S.A.111(42):15072-15077)。

蛋白质印迹分析:一个代表性批次在除野生型小鼠的脑外的所有检验组织中检测到MLKL表达,而在MLKL-/-小鼠的任何组织中均未观察到靶条带(Murphy,J.M.,et al.(2013).Immunity.39(3):443-453)。
该抗MLKL抗体(克隆3H1)已被验证可用于免疫细胞化学、免疫沉淀和蛋白质印迹法检测MLKL。

质量

通过蛋白质印迹在小鼠心脏组织裂解物中进行评价。

蛋白质印迹分析:0.5 µg/mL的该抗体在10 µg小鼠心脏组织裂解物中检测到MLKL。

目标描述

观测分子量〜52 kDa。计算分子量54.48/30.28(人亚型1/2)和54.32/53.38 kDa(小鼠亚型1/2)。在某些细胞裂解物中可能会观察到未表征的条带。

外形

形式:纯化
纯化的大鼠IgG,溶于含0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、150 mM NaCl和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。

其他说明

浓度:关于批次特定浓度请参见检验报告。

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable


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RIPK1- and RIPK3-induced cell death mode is determined by target availability.
Cook, WD; Moujalled, DM; Ralph, TJ; Lock, P; Young, SN; Murphy, JM; Vaux, DL
Cell Death and Differentiation null
D M Moujalled et al.
Cell death & disease, 5, e1086-e1086 (2014-03-01)
Necroptosis is a mechanism by which cells can kill themselves that does not require caspase activity or the presence of the pro-apoptotic Bcl-2 family members Bax or Bak. It has been reported that RIPK3 (receptor interacting protein kinase 3) activates
M C Tanzer et al.
Cell death and differentiation, 23(7), 1185-1197 (2016-02-13)
The pseudokinase, MLKL (mixed-lineage kinase domain-like), is the most terminal obligatory component of the necroptosis cell death pathway known. Phosphorylation of the MLKL pseudokinase domain by the protein kinase, receptor interacting protein kinase-3 (RIPK3), is known to be the key
A V Jacobsen et al.
Cell death & disease, 7, e2051-e2051 (2016-01-19)
Necroptosis is a caspase-independent form of regulated cell death that has been implicated in the development of a range of inflammatory, autoimmune and neurodegenerative diseases. The pseudokinase, Mixed Lineage Kinase Domain-Like (MLKL), is the most terminal known obligatory effector in
Sefi Zargarian et al.
PLoS biology, 15(6), e2002711-e2002711 (2017-06-27)
Necroptosis is a regulated, nonapoptotic form of cell death initiated by receptor-interacting protein kinase-3 (RIPK3) and mixed lineage kinase domain-like (MLKL) proteins. It is considered to be a form of regulated necrosis, and, by lacking the "find me" and "eat

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