重组人活性人半胱天冬酶3

特异性：半胱天冬酶-3（也称为CPP32，Yama和apopain）是白介素-1β转化酶（ICE）家族的半胱氨酸蛋白酶的成员。 半胱天冬酶-3以无活性的32 kDa酶原形式存在于细胞中。 在凋亡过程中，procaspase-3通过自身蛋白水解和/或上游半胱天冬酶（例如半胱天冬酶-6（Mch2），半胱天冬酶-8（FLICE）颗粒酶B）的裂解在天冬氨酸残基处加工。半胱天冬酶-3的加工形式由大（17 kDa）和小（12 kDa）亚基缔合形成活性酶。 活性半胱天冬酶-3已显示参与几种重要分子的蛋白水解，例如聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP），固醇调节元件结合蛋白（SREBPs），局灶性粘连激酶（FAK）等。

具有全长His-6标签的部分纯化*活性重组人半胱天冬酶-3蛋白在大肠埃希菌中表达。 表达的半胱天冬酶-3自发地进行自动加工，以产生天然酶的亚基特征。 重组半胱天冬酶-3优先切割半胱天冬酶-3底物（例如DEVD-AFC或DEVD-pNA）。 结合半胱天冬酶-3活性测定，活性重组半胱天冬酶-3在半胱天冬酶抑制剂的生物学筛选中非常有用。 重组酶也可以用作半胱天冬酶测定或确定半胱天冬酶底物特异性的阳性对照。

*凝胶分析10-25%半胱天冬酶-3蛋白，也含有大肠埃希菌蛋白。 约0.8-2 μg总蛋白/单位活性。 GenBank # U13737。

蛋白质印迹：每个泳道1-5 μL储备液。 蛋白是带有His-tag的全长半胱天冬酶3。它是自动激活的，因此将观察到活性的半胱天冬酶亚基，

并且根据抗体的不同，可以观察到17kDa+12kDa（大亚基和小亚基）。在大多数蛋白质中，小亚基极难检测到。无活性酶的大小约为32 kDa。

激活：不需要。当在大肠埃希菌中表达时，半胱天冬酶-3自发地进行自动加工以产生活性酶的亚基特征。

比活度：重组半胱天冬酶-3的一个单位是在饱和底物浓度下于37°C每小时裂解1 nmol的半胱天冬酶底物DEVD-pNA（pNA：对硝基苯胺）的酶活性。

冻干。 用含15%甘油的PBS复溶至1单位/μL。

具有全长HIS-6-tag的部分纯化的重组半胱天冬酶3。 大约10-20%的半胱天冬酶3蛋白。 其余是大肠埃希菌蛋白。 约0.8-2 mg总蛋白/U活性；大肠埃希菌蛋白没有反应性。

将未开封和再水化的产品以未稀释的，冻融保护的，密封的等分试样在-70°C下保存。应避免反复冻/融循环。如果处理得当，产品自购买之日起可稳定保存6个月。

具有全长HIS-6-tag的部分纯化的重组半胱天冬酶3。 大约10-20%的半胱天冬酶3蛋白。 其余是大肠埃希菌蛋白。 约0.8-2 mg总蛋白/U活性；大肠埃希菌蛋白没有反应性。

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