InnoZyme 髓过氧化物酶活性试剂盒

InnoZyme 髓过氧化物酶活性试剂盒是一种特异性且灵敏的测定法，旨在测量髓过氧化物酶活性并筛选酶抑制剂。该测定法使用固定在 96 孔板上的人 MPO 特异的多克隆抗体来特异性捕获酶。使用包括 TMB 和过氧化氢的检测试剂测量捕获的髓过氧化物酶的活性。显色后，用硫酸终止反应，并在 450 nm 处检测到氧化的 TMB 的吸光度。

抗 MPO 包被的 96 孔板、MPO 标准液、TMB、过氧化氢、检测缓冲液、样品缓冲液、终止液、板密封剂和说明书。

毒性：多个毒性值，请参阅 MSDS（O）

试验时间：2 h

Calbiochem InnoZyme 髓过氧化物酶活性试剂盒旨在测量细胞裂解液和生物样品中的人髓过氧化物酶活性，并筛选酶抑制剂。

该试剂盒提供了进行检测所需的所有试剂。使用前将所有试剂平衡至室温(15-25°C) 。样品缓冲液（1X）：通过将 25 ml 样品缓冲液添加到 475 ml dH₂O 中来稀释样品缓冲液（1:20）。髓过氧化物酶标准品(1g/ml)：通过将 5 l 髓过氧化物酶标准品添加到 495 l 冰冷的样品缓冲液（1X）中来稀释髓过氧化物酶标准品（1：100），获得浓度为 1 g/ml 的溶液。将稀释的髓过氧化物酶标准品（1 g/ml）保存在冰上。注意：初次解冻后，应将髓过氧化物酶标准品分装成等分试样并储存于 -20°C。避免反复冻融。<div class="Bio_doc_image">
表1：髓过氧化物酶标准稀释液
按照上述指南制备 5-100 ng/ml 范围内的髓过氧化物酶标准稀释液。
</div>过氧化氢(0.3%)：通过将 5 l 过氧化氢（30％）添加到 495 l 冰冷的 dH₂O 中来稀释过氧化氢（30％）（1：100）。注意：总共需要 40 l 才能覆盖整个 96 孔包被板。如果一次不使用整个板，则每次进行测定时都要制备新鲜的过氧化氢（0.3％）。最初解冻后，应将过氧化氢分装成等分试样并储存于 -20°C。避免反复冻融。TMB 检测试剂：注意：所需数量的 TMB 检测试剂应现配现用。要制备 TMB 检测试剂，请混合以下成分：

• 7.16 ml dH₂O
• 2.00 ml 检测缓冲液
• 0.80 ml TMB
• 40 l H₂O₂(0.3%)

轻轻涡旋3 X 3 s 要为若干试纸准备TMB检测试剂，请使用下列指南。<div class="Bio_doc_image">表2：制备TMB检测试剂
要为若干试纸准备TMB检测试剂，请使用上述指南。
</div>

根据需要用样品缓冲液（1X）稀释样品。注意：如果出于灵敏度原因不需要稀释样品，可通过将 475 µl 样品加入 25 µl 20X 样品缓冲液中来制备样品，以确保首次孵育的合适 pH。

自收到之日起，将未拆封的试剂盒储存于 -20°C。试剂盒中的所有组件一旦打开，在以下条件下最多可以存储 3 个月：



储存于 4°C：TMB、抗 MPO 包被的 96 孔板、检测缓冲液、终止液和样品缓冲液

储存于 -20°C：髓过氧化物酶标准品和过氧化氢



注意：初次使用后，应将髓过氧化物酶标准品和过氧化氢分装成等分试样，并储存于 -20°C。避免冻/融循环。

阳性对照
人髓过氧化物酶

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Winterbourn, C.C., et al. 2000.Curr.Opin.Hematol.7, 53.
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Zheng, L., et al. 2004. J. Biol. Chem. in press
Vita, J.A., et al. 2004. Circulation, 110, 1134.

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