抗磷酸化糖皮质激素受体抗体（Ser287）

糖皮质激素受体（Uniprot P06536；也称GR、核受体亚家族3C组成员1）由大鼠的Nr3c1（也称Grl、Grc）基因（基因ID：24413）编码。它具有双重作用模式，即作为一种转录因子，结合核和线粒体DNA的糖皮质激素反应元素，也可作为其他转录因子的调节剂。GR由几个保守的结构元件组成，包括羧基末端配体结合域（包含对受体二聚化和激素依赖性基因转激活至关重要的残基）、包含核定位信号的邻近铰链区、中心含锌指的DNA结合域以及参与配体非依赖性基因转录的氨基末端可变区。在缺乏激素的情况下，大量GR通过与调控伴侣蛋白（如HSP90、HSP70和FKBP52）的关联，以非活性形式定位于细胞质中。在激素结合后，GR从伴侣复合物中释放出来，并以二聚体的形式转运到细胞核中，与糖皮质激素反应元件（GRE）结合，从而增强或抑制特定靶基因的转录。GR介导的转录激活通过磷酸化调节，在与受体激动剂结合后变为过度磷酸化。虽然GR的基础Ser155和Ser287磷酸化程度较低，但高度受BDNF处理诱导。据报道，BDNF诱导的磷酸化增加了GR占用和BDNF增强基因启动子上的辅因子募集。

该多克隆抗体检测到BDNF+/和TrkB TrkB+/小鼠脑组织中GR S287磷酸化降低，以及诱导性BDNF过表达时GR pS287的上调和基因缺失GR等位基因转基因小鼠的Cre依赖性GR pS287下调（Lambert, W.M., et al. (2013).Mol. Cell. Biol. 33(18):3700-3714）。目标磷酸化位点对应于UniProt报道的大鼠GR剪接亚型A的Ser287和亚型B的Ser260（P06536）。在UniProt（P04150 P06537）报道的人类GR序列（α-B & β-B亚型的Ser247，除GR- p外的其他7个剪接亚型的Ser267）和小鼠GR序列（1-A & 1-B亚型的Ser275，2-A & 2-B亚型的Ser248）中也发现了相同的位点（P04150 & P06537）。

合成肽，对应于含有磷酸化丝氨酸残基的大鼠糖皮质激素受体靶位点序列。

使用该兔多克隆抗-GR pSer287检测丝氨酸287上的磷酸化糖皮质激素受体，目录号：ABS1582，经验证可用于蛋白质印迹和免疫荧光、蛋白质印迹和染色质免疫沉淀（ChIP）。

蛋白印迹分析：4.2 µg/mL代表性样品在野生型、GR S287A敲入小鼠的耳成纤维细胞中检测到100 nM地塞米松/100 nM H2O2处理诱导的糖皮质激素受体Ser287磷酸化（Elina Sherestha和Michael J. Garabedian，PhD）。

染色质免疫组化（ChIP）分析：代表性批次在地塞米松处理或 BDNF/地塞米松共处理稳定表达野生型大鼠GR的293TrkB细胞后，检测到SGK1和GILZ调节区GR的Ser287磷酸化增强（Lambert, W.M., et al. (2013).Mol. Cell. Biol. 33(18):3700-3714）。

免疫荧光分析：采用4%多聚甲醛固定的自由漂浮小鼠冠状面荧光免疫组化染色，检测下丘脑产生CRH的神经元中GR S287的磷酸化水平。在BDNF+/和TrkB TrkB+/小鼠的脑组织中，GR S287磷酸化水平降低，在诱导BDNF过表达时磷酸化水平升高，在基因缺失GR等位基因转基因小鼠中，进行Cre依赖性切除后，磷酸化水平降低（Lambert, W.M., et al. (2013).Mol. Cell. Biol. 33(18):3700-3714）。

蛋白质印迹分析代表性批次在原代大鼠皮质神经元、表达TrkB的PC12细胞和稳定表达野生型大鼠GR的293TrkB细胞中，检测到BDNF诱导的GR Ser287磷酸化，以及在地塞米松注射或强迫游泳应激诱导的内源性糖皮质激素升高后，检测到小鼠大脑中GR Ser287磷酸化上调（Lambert, W.M., et al. (2013).Mol. Cell. Biol. 33(18):3700-3714）。

已通过蛋白质印迹法在小鼠耳成纤维细胞中进行了评估。

蛋白质印迹分析：2.1 µg/mL该抗体在野生型、GR s287a敲入小鼠的耳成纤维细胞中检测到100 nM地塞米松/100 nM H2O2处理诱导的糖皮质激素受体Ser287磷酸化。

观测分子量〜90 kDa。85.66/81.51/85.82/81.67/64.75/60.60/82.85/78.70/82.90 kDa（人亚型Alpha-A/Beta-A/Alpha-2；Gamma/Beta-2/GR-A alpha/GR-A beta/Alpha-B/Beta-B/hGRDelta313-338）、86.05/86.21/83.27/83.43 kDa（小鼠亚型1-A/2-A/1-B/2-B）和87.56/84.83 kDa（大鼠亚型A/B）计算值。在一些裂解液中可能会观察到未表征的条带。

纯化兔多克隆抗体，缓冲液含TBS，pH 8.0，不含防腐剂。

浓度：请参考特定批次的数据表。