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文件

ABE250-S

Sigma-Aldrich

抗二甲基组蛋白H3(Lys4)抗体,试验装

from rabbit, purified by affinity chromatography

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别名:
H3 histone family, member T, Histone 3, H3, Histone cluster 3, H3, H3K4me2
UNSPSC代码:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

生物来源

rabbit

质量水平

抗体形式

affinity isolated antibody

抗体产品类型

primary antibodies

克隆

polyclonal

纯化方式

affinity chromatography

种属反应性

rat, chicken, human, mouse

技术

ChIP: suitable (ChIP-seq)
dot blot: suitable
immunocytochemistry: suitable
western blot: suitable

NCBI登记号

UniProt登记号

运输

wet ice

靶向翻译后修饰

dimethylation (Lys4)

基因信息

human ... HIST1H3F(8968)

一般描述

组蛋白H3是参与真核细胞染色质结构的五种主要组蛋白之一。H3具有一个主要的球状结构域和一个长N末端的尾巴,其与核糖体核小体′串珠′结构体的结构有关。组蛋白H3的N末端尾部从球状核小体核心突起,其可能发生几种不同类型的表观遗传修饰,从而影响细胞过程。这些修饰包括甲基或乙酰基与赖氨酸和精氨酸的共价连接,以及丝氨酸或苏氨酸的磷酸化。组蛋白H3在Lys4处的二甲基化与许多基因的转录活性相关。

特异性

基于序列相似性,预期具有广泛的物种交叉反应。
该抗体可识别在Lys4处二甲基化的组蛋白H3。

免疫原

KLH偶联的线性肽对应于在Lys4处甲基化的组蛋白H3。
表位:三甲基化的Lys4

应用

免疫细胞化学分析:
代表性批次的1:500稀释液在NIH/3T3和A431细胞中检测到组蛋白H3。

斑点印迹分析
:代表性批次的1:1,000稀释液在Lys4二甲基修饰的组蛋白H3肽中特异性检测到组蛋白H3,但未检测到与其他修饰和未修饰的组蛋白相对应的潜在交叉反应肽。

染色质免疫沉淀分析:
使用4 µg正常IgG(部件号12-370)或4 µL抗二甲基组蛋白H3(Lys4)(部件号ABE250)和Magna ChIPA/G试剂盒(目录号17-10085)对从HeLa细胞(1 × 10E6细胞当量/IP)制备的超声染色质进行染色质免疫沉淀。 使用对人GAPDH编码区具有特异性的引物,通过qPCR验证了与二甲基组蛋白H3(Lys4)相关的DNA片段的成功免疫沉淀。
有关实验详情,请参阅EZ-Magna ChIP A/G(目录号17-10085)方案。

ChIP测序
染色质免疫沉淀使用Magna ChIP HiSens试剂盒(目录号17-10460),5 µg抗二甲基组蛋白H3(Lys4)抗体(ABE250-S)的代表性批次,20 µL蛋白A/G珠和5e6交联的HeLa细胞染色质进行,然后使用磁珠纯化DNA。使用标准方案从Input和ChIP DNA样品制备文库,带Illumina条形码适配器,并在Illumina HiSeq仪器上进行分析。在去除TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/)标签后,使用Bowtie(http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml)映射了 FastQ 文件中的超过1200万次读取。使用 MACS(http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/)识别峰,并从 BigWig 和 BED 文件在 UCSC Genome Browser(http://genome.ucsc.edu)中以自定义轨道的形式显示峰和读数。
抗二甲基组蛋白H3(Lys4)抗体,试验规模是兔多克隆抗体,用于检测在赖氨酸4处二甲基化的组蛋白H3。也称为H3K4me2,该抗体具有斑点印迹(DB)证明的特异性&已在WB,ICC,ChIP中验证。小包装尺寸是筛选应用的理想选择。
研究子类别
组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能

质量

使用HeLa酸提取物和重组组蛋白通过蛋白质印迹进行评估。

蛋白质印迹分析:该抗体的1:1,000稀释液在10 µg HeLa 酸提取物中检测到组蛋白H3。

目标描述

观察值〜17 kDa

外形

亲和纯化
在含 0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4),150 mM NaCl 和 0.05% 叠氮化钠的缓冲液中的纯化的兔多克隆抗体。

储存及稳定性

自收到之日起,在 2-8°C 条件下可稳定保存1年

分析说明

对照
HeLa 酸提取物

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