抗-磷酸TFEB（Ser142）抗体

转录因子EB（UniProt P19484；也称为bHLHe35，E类碱性螺旋-环-螺旋蛋白35）由人的TFEB（也称为αTFEB，BHLHE35，TCFEB）基因（基因ID 7942）编码。TFEB是碱性螺旋-环-螺旋（bHLH）亮氨酸拉链转录因子，在溶酶体生物发生的调节中起主要作用。TFEB还是对饥饿转录反应的主要参与者，并通过正向调节自噬体形成和自噬体-溶酶体融合来控制自噬。TFEB在Ser142处被mTORC1和ERK磷酸化，从而阻止了其核易位。mTORC1的药理抑制作用以及饥饿和溶酶体破坏可激活TFEB核易位。类似地，显示丝氨酸-苏氨酸激酶RIP1/RIPK1通过激活ERK抑制基础自噬流，进而使Ser142处的TFEB磷酸化，从而阻止参与自噬的基因产物的TFEB介导的转录。

该多克隆抗体仅在表达野生型TFEB的细胞的裂解物中检测到靶带，但在表达具有S142A突变的TFEB的细胞中未检测到靶带（Yonekawa, T., et al. (2015).Nat. Cell Biol. EMBO Rep.16(6):700-708).目标磷酸化位点在鼠（Ser141；UniProt Q9R210）和大鼠（Ser142；UniProt F7F5J1）TFEB蛋白中是保守的，但在人TFEB剪接亚型2（UniProt P19484-2）中不存在。

对应于含有磷酸化Ser142的人TFEB序列的KLH偶联线性肽。

表位：pSer142。

抗磷酸TFEB（Ser142）抗体是一针对磷酸TFEB的抗体，用于蛋白质印迹分析。

蛋白质印迹分析：在RIP1 shRNA处理后，代表性批次在对照HeLa细胞中检测到Ser142磷酸化的TFEB，但在RIP1缺陷型HeLa细胞中未检测到（Yonekawa, T., et al. (2015).Nat. Cell Biol. EMBO Rep.16(6):700-708）。
蛋白质印迹分析：在向营养缺乏的HEK293T转染子中添加氨基酸后，代表性批次检测到外源表达的野生型而非S142A突变体TFEB（具有3xFLAG标签）的Ser142磷酸化诱导（Settembre, C., et al. (2012).EMBO J. 31(5):1095-1108）。
蛋白印迹分析: 代表性批次在饥饿的HeLa转染子中检测到营养诱导的外源表达的TFEB（带有3xFLAG标签）的Ser142磷酸化。mTOR抑制剂Torin1（目录号475991）的预处理完全阻止了营养诱导的TFEB Ser142磷酸化，较弱的mTOR抑制剂雷帕霉素（目录号553210）部分抑制了Ser142磷酸化诱导（Settembre, C., et al. (2012).EMBO J. 31(5):1095-1108）。

通过蛋白质印迹在TFEB转染的HEK293细胞的裂解物中进行了评估。

蛋白质印迹分析：该抗体的1：12500稀释液在转染的HEK293细胞的10 µg裂解物中检测到FLAG标记的人TFEB的Ser142磷酸化。

观察值~60 kDa（带有3xFLAG标签）计算分子量为52.87 kDa。某些裂解液可能会出现未表征的条带。

浓度：请参考特定批次的数据表。