一般描述
大肠杆菌中多个靶基因的共表达对于研究蛋白质复合物是有利的。共表达通常可获得最佳的产率、溶解度和活性,并可以保护单个亚基免于降解。Duet载体是T7启动子表达载体,每个载体设计为在大肠杆菌中共表达两个靶蛋白。Duet载体带有相容的复制子和抗生素抗性标记,可以在适当的宿主菌株中一起使用,以共表达多达八种蛋白质。Duet载体和pET或pETcoco载体的某些组合也可用于共表达。Duet载体被共转化、繁殖和诱导以实现强大的靶蛋白共表达的能力使其成为分析蛋白复合物的理想选择。Duet载体设计有兼容的复制子和耐药基因,可在单个细胞中有效繁殖和维持四个质粒。
pETDuet-1设计用于两个靶基因的共表达。该载体编码两个多克隆位点(MCS),每个位点之前都有一个T7启动子、lac操纵子和核糖体结合位点(rbs)。该载体还携带pBR322衍生的ColE1复制子、lacI基因和氨苄西林抗性基因。可以在合适的宿主菌株中将该载体与pACYCDuet-1、pCDFDuet-1和pRSFDuet-1或pCOLADuet-1一起转化到同一细胞中,以共表达多达八个靶基因。可以使用pETUpstream引物和DuetDOWN1引物对插入MCS-1的基因进行测序。可以使用DuetUP2引物和T7终止子引物对插入MCS-2的基因进行测序。
本产品的商业使用需要获得EMD Millipore Corporation的商业许可。 商业用途应包括但不限于(1)在制造中使用产品或其组件;(2)使用产品或其组件向他人收费提供服务、信息或数据;(3)将产品或其组件(或其任何衍生物)用于治疗、诊断或预防目的(包括作为设备、芯片、检测或其他产品的一部分);(4)转售产品或其组件,无论该产品或其组件是否转售用于研究。 此处包含的任何内容均不应被视为代表或保证使用本产品不需要其他第三方权利。
pETDuet-1设计用于两个靶基因的共表达。该载体编码两个多克隆位点(MCS),每个位点之前都有一个T7启动子、lac操纵子和核糖体结合位点(rbs)。该载体还携带pBR322衍生的ColE1复制子、lacI基因和氨苄西林抗性基因。可以在合适的宿主菌株中将该载体与pACYCDuet-1、pCDFDuet-1和pRSFDuet-1或pCOLADuet-1一起转化到同一细胞中,以共表达多达八个靶基因。可以使用pETUpstream引物和DuetDOWN1引物对插入MCS-1的基因进行测序。可以使用DuetUP2引物和T7终止子引物对插入MCS-2的基因进行测序。
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警告
毒性:标准处理(A)
其他说明
载体家族:Duet pET原核细菌
法律信息
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
Journal of molecular biology, 431(24), 4882-4896 (2019-11-05)
Multidrug-resistant gram-negative bacteria infection is particularly severe within the designated ESKAPE pathogens (Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, and Enterobacter species), which underscores the urgent need to explore alternative therapeutic strategies. The type III secretion system
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